توضیحات
محیط کشت میکروبی Presence-Absence Broth و چه کاربردی دارد؟
محیط کشت میکروبی (Presence-Absence Broth (PA Broth یک محیط کشت انتخابی برای کشت باکتری های coliform موجود در آب می باشد . این محیط کشت بر اساس متد های استاندارد موجود (US-EPA) برای آزمایش آب استفاده می شود.
پپتون و عصاره گوشت ، مواد مغذی و مقدار اندک عنصار لازم برای رشد باکتری را فراهم می کند ، در حالیکه بافر فسفات و سدیم کلراید یک گنجایش بافری مناسب و تعادل اسمزی را برقرار می کنند.
ارگانیسم هایی که لاکتوز را تخمیر می کنند، باعث تشکیل اسید می شوند که اسید تشکیل شده در محیط محیط کشت میکروبی (Presence-Absence Broth (PA Broth ، با تغییر PH مشخص می شود که تغییر PH نیز توسط اندیکاتور PH یعنی bromocresol بنفش که رنگ آن در صورت تولید اسید از بنفش به قهوه ای تغییر می یابد، قابل تشخیص می باشد.
ترکیب انتخابی محیط ، سدیم لوریل سولفات می باشد که به صورتی قابل توجه فلورهای میکروبی ناخواسته موجود درمحیط کشت را مهار می کند ولی از رشد coliform ها ممانعتی به عمل نمی آورد.
نحوه نگه داری:
پودر محیط کشت را در ۱۰ تا ۳۰ درجه سانتی گراد و در محیطی خشک نگه دارید و قبل از منقضی شدن یا ایجاد آلودگی در آن ، آن را مصرف کنید.
محیط کشت آماده را هم در ۲ تا ۸ درجه سانتی گراد نگه دارید.
طرز تهیه کلی محیط های کشت :
همانطوریکه می دانید محیطهای کشت به سه دسته جامد ، نیمه جامد ، مایع تقسیم می شوند . محیطهای مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است . مثلاً حدود ( ۲/۰%) و محیط های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم وبالاخره محیط های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .
برای ساختن محیط های کشت باکتری، از پودر مخصوص که در شیشه های مربوطه قرار دارد، استفاده می کنیم.
در روی این شیشه ها ترکیب محیط بطور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است.
مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده ودر مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته اید اضافی نموده و آنرا کاملاً حل نمائید.
سپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید.
تا زمان جوشیدن آنرا چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و بمدت یک دقیقه بجوشد.
پس از آنکه مایع بجوش آمد ، آنرا برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید .
ظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود.
در ادامه…
بعد از استریل کردن بگذارید تا حدود c450– 40 خنک شود .
سپس در حالیکه ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آنرا با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید.
محتویات را درون پلیت های استریل شده بین cc20- 15 از محل محلول بریزید.
بعد پلیت ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند وازتکان دادن آن خودداری نمائید.
پس از جامد شدن محیطهای کشت نوترینت آگار را جمع کرده ودر c370 بمدت ۲۴ ساعت قرار دهید.
اگر محیط ها آلوده نشده باشند آنها را از c370 بیرون بیاورید.
در یخچال ۴ درجه سانتی گراد قرار می‌دهید .
نکته
طرز ساختن سایر محیطهای کشت، همینطور می‌باشد.
منتهی بعضی از محیطهای جامد در لوله مستقیم، پس از جوشاندن ریخته شده و بعد استریل می‌شوند.
این محیطها را پس از استریل شدن، به طور ایستاده و یا کج می‌گذاریم تا سرد شوند .
برای ساختن محیط مایع (براث) پس از جوشاندن، محیط را در لوله ها تقسیم میکنیم.
سپس با پنبه‌ای درب آنها را مسدود میکنیم.
جهت استریل داخل اتوکلاو قرار می‌دهیم .
محیط کشت میکروبی Presence-Absence Broth ایبرسکو را به سبد خود اضافه و یا از برندهای وارداتی کندا (هیسپان) لب ، کیولب و مرک استعلام نمایید.
مجموعه وندیداز مفتخر است با ارائه محیط کشت
با بهترین قیمت و کیفیت در خدمت جامعه آزمایشگاهی کشور و پیشرفت آن باشد
لینک های مفید:
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.