توضیحات

محیط کشت Phenol Red Mannitol Agar چیست و چه کاربردی دارد؟

محیط کشت Phenol Red Mannitol Agar محیط کشتی است که برای تشخیص استافیلوکوکوس های موجود در مواد غذایی و مواد دیگر کاربرد دارد. تنها میکروارگانیسم هایی که تحمل محیط نمکی را دارند می توانند در این محیط کشت رشد کنند که این گروهاز میکروارگانیسم ها شامل استافیلوکوکوس ها می شوند که به علت حضور زیاد نمک در این محیط کشت ، قادر به رشد در این محیط می باشند. تخریب و تبدیل مانیتول به اسید ( به میزان زیاد یاکم ) به بیماری زایی استافیلوکوکوس ها وابسته است و بنابراین به عنوان اندیکاتوری برای این تشخیص میزان بیماری زایی این میکروارگانیسم ها به کار می رود.

مواد موجود در محیط کشت Phenol Red Mannitol Agar :

پپتون از کازئین ۵٫۰ . بافت حیوانی هضم شده به روش آزیمی ۵٫۰٫ عصاره گوشت ۱٫۰٫ سدیم کلرید ۷۵٫۰٫ D(-) – مانیتول ۱۰٫۰٫ فنول رد ۰٫۰۲۵٫ آگار-آگار ۱۲٫۰٫

آماده سازی :

سوسپانسیون رادر غلظت ۱۰۸ گرم بر لیتر آماده کنید و آن را در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد و به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید و سپس  در پلیت ها بریزید. PH را حدود ۷٫۴ و دما را ۲۵ درجه تنظیم کنید . پلیت ها باید شفاف و به رنگ قرمز در آمده باشتد.

روش آزمایش :

با گسترش نمونه درسطح محیط کشت ، آن ها را تلقیح کنید. تلقیح باید با توجه به اثر مهاری قوی محیط، بزرگ باشد.

انکوباسیون:باید تا ۳ روز در دمای ۳۵ درجه سانتی گراد به صورت هوازی انکوبه شود.

تست های بیشتری باید انجام شود برای تایید تشخیص.

طرز تهیه کلی محیط های کشت :

همانطوریکه می دانید محیطهای کشت به سه دسته جامد ، نیمه جامد ، مایع تقسیم می شوند . محیطهای مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است . مثلاً حدود ( ۲/۰%) و محیط های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم وبالاخره محیط های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .

برای ساختن محیط های کشت باکتری، از پودر مخصوص که در شیشه های مربوطه قرار دارد، استفاده می‌ کنیم.

در روی این شیشه ها ترکیب محیط بطور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است.

مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده ودر مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته اید اضافی نموده و آنرا کاملاً‌ حل نمائید.

سپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید.

تا زمان جوشیدن آنرا چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و بمدت یک دقیقه بجوشد.

پس از آنکه مایع بجوش آمد ، آنرا برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید .

ظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود.

در ادامه…

بعد از استریل کردن بگذارید تا حدود c450– 40 خنک شود .

سپس در حالیکه ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آنرا با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید.

محتویات را درون پلیت های استریل شده بین cc20- 15 از محل محلول بریزید.

بعد پلیت ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند وازتکان دادن آن خودداری نمائید.

پس از جامد شدن محیطهای کشت نوترینت آگار را جمع کرده ودر c370 بمدت ۲۴ ساعت قرار دهید.

اگر محیط ها آلوده نشده باشند آنها را از c370 بیرون بیاورید.

در یخچال ۴ درجه سانتی گراد قرار می‌دهید .

نکته

طرز ساختن سایر محیطهای کشت، همینطور می‌باشد.

منتهی بعضی از محیطهای جامد در لوله مستقیم، پس از جوشاندن ریخته شده و بعد استریل می‌شوند.

این محیطها را پس از استریل شدن، به طور ایستاده می‌گذاریم مثل محیط SIM و یا کج می‌گذاریم مثل محیط TSI تا سرد شوند .

برای ساختن محیط مایع (براث) پس از جوشاندن، محیط را در لوله‌ ها تقسیم می‌کنیم و سپس با پنبه‌ای درب آنها را مسدود میکنیم.

جهت استریل داخل اتوکلاو قرار می‌دهیم .

 

مجموعه وندیداز مفتخر است با ارائه محیط کشت
با بهترین قیمت و کیفیت در خدمت جامعه آزمایشگاهی کشور و پیشرفت آن باشد

لینک های مفید:

توضیحات تکمیلی

بسته بندی

100g, 500g

دیدگاهها

هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.

اولین نفری باشید که دیدگاهی را ارسال می کنید برای “محیط کشت Phenol Red Mannitol Agar”

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد.