توضیحات

محیط کشت Oxidation Fermentation چیست و چه کاربردی دارد؟

محیط کشت OF (Oxidation Fermentation) Basal medium برای تشخیص واکنش های اکسیداسیون و تخمیر کربوهیدرات ها توسط باکتری های گرم منفی به کار می رود.

ترکیبات:

  • هیدرولیز هضم شده آنزیمی ۲٫۰۰۰ گرم بر لیتر
  • کدیم کلرید ۵٫۰۰۰ گرم بر لیتر
  • دی پتاسیم فسفات ۰٫۳۰۰ گرم بر لیتر
  • برومو تیمول بلو ۰٫۰۸۰ گرم بر لیتر
  • آگار ۲٫۰۰۰ گرم بر لیتر
  • PH نهایی باید حدود ۶٫۸ باشد.

همان طور که قبلا هم گفته شد این محیط کشت برای مطالعه واکنش های اکسیداسیون و تخمیر کربوهیدرات ها توسط باکتری های گرم منفی به کار می رود. از این مطالعات جهت اطلاعات تاکسونومی انتروباکتریاسه بهره می گیرند. هیدرولیز هضم شده آنزیمی  موجود در محیط کشت ، کربن و نیتروژن لازم و ویتامین ها و سایر مواد لازم برای رشد باکتری را برای آن فراهم می کند. کربوهیدراتی هم  که قرار است مطالعه روی واکنش تخمیر آن صورت گیرد به صورت مجزا افزوده می شود. در این محیط کشت از بافر فسفات استفاده می شود، همچنین غلظت کم آگار ، حرکت  و پراکندگی اسید تولید شده در سطح را تعیین می کند.

برووتیمول بلو به عنوان اندیکاتور PH به کار می رود.

حرکت اسید به صورت حطوط انتشاری که از خط تلقیح بیرون زده اند مشاهده می شود. این در حالیست که میکروارگانیسم های بدون حرکت، در طول خط تلقیح رشد می کنند. دکستروز مهم ترین کربوهیدرات مورد استفاده در این محیط کشت می باشد. تخریب کربوهیدرات و تبدیل آن به اسید توسط اندیکاتور PH که در اینجا برومو تیمول بلو می باشد مشخص می سود که در این تبدیل ، رنگ آن به زرد تغییر می یابد. استفاده از اکسیداسیون زمانی صورت می گیرد که محیط کشت در شرایط هوازی صورت گیرد، ولی استفاده از تخمیر تنها زمانی صورت می گیرد که محیط کشت در شرایط  بی هوازی باشد.

طرز تهیه کلی محیط های کشت :

همانطوریکه می دانید محیطهای کشت به سه دسته جامد ، نیمه جامد ، مایع تقسیم می شوند . محیطهای مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است . مثلاً حدود ( ۲/۰%) و محیط های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم وبالاخره محیط های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .

برای ساختن محیط های کشت باکتری، از پودر مخصوص که در شیشه های مربوطه قرار دارد، استفاده می‌ کنیم.

در روی این شیشه ها ترکیب محیط بطور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است.

مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده ودر مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته اید اضافی نموده و آنرا کاملاً‌ حل نمائید.

سپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید.

تا زمان جوشیدن آنرا چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و بمدت یک دقیقه بجوشد.

پس از آنکه مایع بجوش آمد ، آنرا برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید .

ظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود.

در ادامه…

بعد از استریل کردن بگذارید تا حدود c450– 40 خنک شود .

سپس در حالیکه ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آنرا با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید.

محتویات را درون پلیت های استریل شده بین cc20- 15 از محل محلول بریزید.

بعد پلیت ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند وازتکان دادن آن خودداری نمائید.

پس از جامد شدن محیطهای کشت نوترینت آگار را جمع کرده ودر c370 بمدت ۲۴ ساعت قرار دهید.

اگر محیط ها آلوده نشده باشند آنها را از c370 بیرون بیاورید.

در یخچال ۴ درجه سانتی گراد قرار می‌دهید .

نکته

طرز ساختن سایر محیطهای کشت، همینطور می‌باشد.

منتهی بعضی از محیطهای جامد در لوله مستقیم، پس از جوشاندن ریخته شده و بعد استریل می‌شوند.

این محیطها را پس از استریل شدن، به طور ایستاده می‌گذاریم مثل محیط SIM و یا کج می‌گذاریم مثل محیط TSI تا سرد شوند .

برای ساختن محیط مایع (براث) پس از جوشاندن، محیط را در لوله‌ ها تقسیم می‌کنیم و سپس با پنبه‌ای درب آنها را مسدود میکنیم.

جهت استریل داخل اتوکلاو قرار می‌دهیم .

 

مجموعه وندیداز مفتخر است با ارائه محیط کشت
با بهترین قیمت و کیفیت در خدمت جامعه آزمایشگاهی کشور و پیشرفت آن باشد

لینک های مفید:

توضیحات تکمیلی

بسته بندی

100g, 500g

دیدگاهها

هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.

اولین نفری باشید که دیدگاهی را ارسال می کنید برای “محیط کشت Oxidation Fermentation”

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد.