توضیحات
محتویات کیت HIV:
- مستر میکس HIV)Real time):
پرایمر، پروب ، ۵۰ میلی مولار Mgcl2 ، Taq پلی مراز، ۱۰ میلی مولار dNTP ، بافر با آب
- کنترل مثبت ( ۵۰۰,۰۰۰ کپی/میلی لیتر)- کنترل منفی
مخلوط آماده سازی (HIV) :
- ۱۰ میکرولیتر مستر میکس Real time را به هر میکروتیوب اضافه کنید.
- ۵ میکرولیتر DNA ویروسی ، کنترل مثبت و کنترل منفی به هر میکروتیوب بیافزایید، به مدت ۱۰ ثانیه مخلوط و اسپین نمایید، برای ارزیابی کپی نامبر ویروس در نمونه خود ، ۲ تا serial dilutions ساخته و آن را برای فرآیند Real- time PCR خود تعریف کنید.
برنامه (RT-PCR(HIV:
سنتز CDNA:پنجاه درجه به مدت ۳۰ دقیقه
دناتوراسیون آغازی : ۹۵ درجه سانتی گراد به مدت ۵ دقیقه: در این مرحله Taq پلی مراز فعال شده و DNA ویروسی دناتوره می شود.
۴۵ سیکل : ۹۵ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ ثانیه ،۵۵ درجه سانتی گراد به مدت۱۰ ثانیه، ۷۲ درجه به مدت ۳۰ ثانیه
آشکار سازی فلورسنت: در green (FAM) channel و در۵۵ درجه سانتی گراد.
آنالیز Real-time:
اگر بعد از ۴۰ سیکل نمونه مثبت بود، آزمایش باید دوباره انجام شود.
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.