توضیحات

محتویات کیت microRNAU6 انسانی:

• محتویات مستر میکس سنتز CDNA:

پرایمر looped مخصوص U6، پروب ، 50 میلی مولار Mgcl2 ، Reverse transcriptase، 10 میلی مولار dNTP ، بافر و آب

• مستر میکس Real time :

پرایمر، پروب ، 50 میلی مولار mgcl2 ، Taq پلی مراز ، 10 میلی مولار dNTP ، بافر میکس و آب

• استاندارد 1 (10000 کپی / ML) ، استاندارد2 ( 1000 کپی / ML ) ، استاندارد 3 (100کپی / ML ) و کنترل منفی

مخلوط آماده سازی :

• 10  میکرولیتر مستر میکس را به هر میکروتیوب اضافه کنید.
• 5 میکرولیترDNA ویروسی ، کنترل مثبت و کنترل منفی به هر میکروتیوب بیافزایید، به مدت 10 ثانیه مخلوط  و اسپین نمایید.

برنامه PCR :

سنتز CDNA  : پنجاه درجه به مدت 30 دقیقه

دناتوراسیون آغازی : 95 درجه سانتی گراد به مدت 5 دقیقه : در این مرحله Taq پلی مراز فعال شده و DNA ویروسی دناتوره می شود.

40 سیکل : 95 درجه سانتی گراد به مدت15  ثانیه ، 55  درجه سانتی گراد به مدت10  ثانیه ، 72 درجه سانتی گراد به مدت 25 ثانیه

آشکار سازی فلورسنت : در green (FAM) channel و در 55 درجه سانتی گراد

آنالیز Real time :

در صورتی که بعد از 40 سیکل نمونه مثبت بود ، تست باید دوباره انجام شود.

نمونه: پلاسما ، خون کامل ، بافت

نکاتی درباره microRNAU6 انسانی :

میکرو RNA ، RNA های کوچک ( 20 تا 24 نوکلئوتیدی ) non-coding هستند که در تنظیمات پس از رونویسی ژن در موجودات پر سلولی با تاثیر بر روی پایداری و ترجمه mRNA نقش ایفا می کنند. MiRNAs توسط RNA پلی مراز II به عنوان بخشی از cap و polyadenilation رونویسی می شود . miRNA اولیه (pri-miRNAs) هم می تواند کد کننده پروتئین باشد و هم نباشد.

رفرنس مطلب

مشاهده سایر محصولات مرتبط