استخراج DNA غالبا گام اولیه در بسیاری از فرایندهای تشخیصی است که برای تشخیص باکتری و ویروسها در محیط زیست و نیز تشخیص بیماریها و اختلالات ژنتیکی کاربرد دارد.
این کیت برای استخراج DNA ژنومیک از خون کامل (سیتراته، هپارینه، دارای EDTA)
محلول DNGTM-Plus برای جداسازی DNA دو رشته ای طراحی شده است. استخراج نمونه های انسانی در این روش، به 30-50 دقیقه زمان نیاز دارد. مکانیسم جداسازی DNA در این روش به این صورت است که پس از لیزشدن سلول ها به کمک محلول استخراج، DNA توسط اتانول رسوب داده شده و نمک زدایی می گردد.
محصول نهایی استخراج شده، در تمامی روش های زیست شناسی مولکولی از جمله PCR، ساترن بلات، توالی یابی DNAو غیره استفاده می شود. بازده DNA رنجی بین µg5-1 از 100 میکرولیتر خون تازهاست.
همچنین با استفاده از این محلول دیگر نیازی به فنل یا هضم پروتئیناز در مراحل استخراج نیست. این محلول برای استخراج DNA از 140 نمونه خون آماده شده است و در صورت رقیق سازی می تواند برای 250 نمونه مورد استفاده قرار گیرد.
قابل ذکر است که برای نتیجه دقیق و بهتر از محلول اولیه استفاده شود .اما در صورت لزوم برای رقیق سازی می توان مقادیر زیر را به محلول اضافه کرد:
ایزوپروپانول 75 میلی لیتر
اتانول 75% 250 میلی لیتر
آب مقطر استریل 12.5 متر
کاربرد کیت
- بیولوژی مولکولی مثل برش آنزیمی
- DNA Fingerprinting
- PCR
- Southern blotting
محتویات کیت
- DNG-Plus
توجه: ایزوپرپانول، اتانول و آب مقطر استریل همراه کیت نمی باشد و در صورت نیاز می بایست به صورت جداگانه تهیه گردد.
جهت گرفتن نتیجه بهتر لازم است شرایط زیر در مورد نمونه خون رعایت گردد:
- استفاده از لوله EDTA برای جلوگیری از لخته شدن نمونه خون زیرا در صورت لخته شدن خون، از محصول نهایی نمی توان در PCRاستفاده کرد.
- از فریز و دیفریز شدن مکرر نمونه پرهیز گردد زیرا هربار تغییر دمایی میزان DNA نهایی را تحت تاثیر قرار می دهد.
- برای استخراج DNA از سلول و بافت بهتر است از DNPTM Kit (EX6071) استفاده شود.
نگهداری کیت
- در دمای معمولی اتاق
برای مشاهده پرتوکل استخراج به کاتالوگ محصول مراجعه کنید.
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.