محیط کشت A1 Medium – ای وان مدیوم

محیط کشت A-1 Medium که به نام محیط کشت ای وان مدیوم نیز شناخته می‌شود، مناسب تشخیص ارگانیسم‌های کلی فرم موجود در آب و غذا، در یک محیط آزمایشگاهی استفاده می‌شود. محیط A-1 Medium برای استفاده در تشخیص بیماری یا سایر موارد در انسان در نظر گرفته نشده است. همچنین لازم به ذکر است که از محیط A-1 Medium برای تجزیه‌وتحلیل نمونه‌های آب و غذا برای حضور کلی‌فرم‌های مدفوع، روش‌های افزایش دما و (most-probable-number (MPN به طور مرتب استفاده می‌شود. محیط A-1 Medium برای تسریع بازیابی E. coli و کاهش وقوع مثبت کاذب شدن، کشت طراحی شده است.

آماده‌سازی محیط A-1 Medium

• ۳۱/۵ گرم از محیط را در ۱ لیتر آب مقطر حل کنید.
• حرارت دهید تا پودر محیط کاملاً در آب حل شود.
• در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید.
•  محیط آماده شده، در صورت نگهداری در تاریکی تا ۱ هفته در دمای اتاق قابل نگهداری است.

فرایند آزمایش A-1 Medium

• نمونه‌ها را در لوله‌های دارای محیط کشت، مطابق با پروتکل MPN در استاندارد مرجع تلقیح کنید.
• لوله‌های تلقیح شده را به مدت ۳ ساعت در دمای ۰/۵±۳۵ درجه سانتی‌گراد گرماگذاری کنید.
• پس از آن لوله‌ها را به بن ماری دارای دمای ۰/۲±۴۴/۵ منتقل کرده و برای ۲۳-۲۱ ساعت دیگر گرماگذاری کنید.
• دقت کنید که سطح آب در بن ماری بالاتر از سطح محیط کشت داخل لوله باشد.

کنترل کیفی A-1 Medium

• ظاهر محیط دهیدراته: بژ روشن و غیریکنواخت
• ظاهر محیط آماده: کهربایی روشن، شفاف، گاهی دارای رسوب
• نتیجه کشت باکتری، پس از گرماگذاری در دمای ۰/۵±۳۵ به مدت ۳ ساعت و سپس در درمای ۰/۲±۴۱/۵ به مدت ۲۳-۲۱ ساعت

ترکیبات A-1 Medium

• Enzymatic Digest of Casein
• Lactose
• Sodium Chloride
• Salicin
• Triton X-100

نتیجه و تفسیر A-1 Medium

تشکیل گاز داخل لوله دورهام نشان‌دهنده وجود کلی‌فرم‌های روده­ای در نمونه مورد آزمایش است. با انجام آزمایش MPN می­توان تعداد کلیفرم های روده­ای در نمونه را محاسبه کرد.

نکات تکمیلی A-1 Medium

• پودر محیط داخل قوطی کاملاً دربسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتی‌گراد و محیط آماده در دمای ۸-۲ درجه سانتی‌گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.
• دقت داشته باشید که تعداد به‌دست‌آمده از شمارش کلیفرم های روده­ای معمولاً بیشتر از تعداد E.coli شمارش شده در نمونه است.
• تفسیر نتایج حاصل از آزمایش‌های انجام‌گرفته با محیط کشت A-1، مستلزم آگاهی از میکروفلور نمونه مورد بررسی است.