توضیحات

محیط کشت CDC Anaerobe Blood Agar Base ، برای کشت میکروارگانیسم های بی هوازی شامل میکروارگانیسم های فستیدیوس از نمونه های بالینی مورد استفاده قرار میگیرد و به عنوان یک محیط مغذی و غیرانتخابی عمل میکند که نه تنها باعث رشد بی هوازی های فستیدیوس میشود بلکه رشد میکرو ارگانیسم های هوازی و میکروآئروفیل را هم قادر میسازد .

این مسئله باعث تشدید شکل گیری هر دو رنگدانه در Bacteroides melaningenicus میشود و هر دو واکنش همولیتیک را در کلستریدیوم پرفرینژنز نشان میدهد . منطقه داخلی همولیز به علت سم زدایی و منطقه بیرونی به علت همولیز ناقص به سم (فعالیت لسیتیناز) دیده میشود .

کازئین پپتون، هضم کننده پاپایا از سویا و عصاره مخمر در محیط سبب فراهم کردن ترکیبات کربن و نیتروژنی برای محیط می شوند.حضور هِمین و ویتامین K1 باعث رشد باکتری های فستیدیوس مانند گونه باکتریویدیس و اسپورزایی باکتری گرم مثبت مانند گونه کلستردیوم میشود ، وجود خون و مواد مغذی در محیط کمک به تشخیص ارگانیسم های همولیتیک میشود .  کلرید سدیم در موجود در محیط ، سبب حفظ تعادل اسمزی محیط می شود.

فرمولاسیون محیط کشت CDC Anaerobe Blood Agar Base:

• Ingredients  Gms / Litre
• Casein enzymic hydrolysate  ۰۰۰
• Papaic digest of soyabean mea l 5.000
• Yeast extract  ۰۰۰
• Sodium chloride  ۰۰۰
• L-Cysteine  ۵۰۰
• Hemin  ۰۰۵
• Agar  ۵۰۰
• Final pH ( at 25°C)  ۴±۰٫۲

طرز تهیه کلی محیط های کشت :

همانطوریکه می دانید محیطهای کشت به سه دسته جامد ، نیمه جامد ، مایع تقسیم می شوند . محیطهای مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است . مثلاً حدود ( ۲/۰%) و محیط های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم وبالاخره محیط های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .

برای ساختن محیط های کشت باکتری، ما از پودر مخصوص که در شیشه های مربوطه قرار دارد، استفاده می‌ کنیم. در روی این شیشه ها ترکیب محیط بطور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است . مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده ودر مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته اید اضافی نموده و آنرا کاملاً‌ حل نمائید وسپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید ، تا زمان جوشیدن آنرا چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و بمدت یک دقیقه بجوشد پس از آنکه مایع بجوش آمد ، آنرا برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید وظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود . بعد از استریل کردن بگذارید تا خنک شود تا حدود c45⁰– 40 . سپس در حالیکه ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آنرا با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید ، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید وبعد درون پلیت های استریل شده بین ^cc20- 15 از محل محلول بریزید . بعد پلیت ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند وازتکان دادن آن خودداری نمائید وپس از جامد شدن محیطهای کشت نوترینت آگار را جمع کرده ودر c37⁰ بمدت ۲۴ ساعت قرار دهید . اگر محیط ها آلوده نشده باشند آنها را از c37⁰ بیرون آورده و در یخچال ۴ درجه سانتی گراد قرار می‌دهید .

طرز ساختن سایر محیطهای کشت، همینطور می‌باشد منتهی بعضی از محیطهای جامد در لوله مستقیم، پس از جوشاندن ریخته شده و بعد استریل می‌شوند که این محیطها را پس از استریل شدن، به طور ایستاده می‌گذاریم مثل محیط SIM و یا کج می‌گذاریم مثل محیط TSI تا سرد شوند .

برای ساختن محیط مایع (براث) پس از جوشاندن، محیط را در لوله‌ ها تقسیم می‌کنیم و سپس با پنبه‌ای درب آنها را مسدود کرده و جهت استریل داخل اتوکلاو قرار می‌دهیم .

لینک های مفید:

• مشاهده محصولات گروه میکروبی
• محصولات سلولی