محیط کشت LMX براث – LMX Modified

محیط کشت LMX براث – LMX Modified برای اولین‌بار در ۱۹۸۹ معرفی و در ۱۹۹۳ اصلاح شد. محیط LMX براث اصلاح شده حاوی بافر فسفات برای تضمین سرعت رشد بالا کلی فرم هاست. همچنین لوریل سولفات تا حد زیادی فلور گرم مثبت را مهار می‌کند.

با افزودن بستر کروموژنیک ۵-bromo-4-chloro-3-indolyl-ß-D-galactopyranoside که توسط کولیفرم ها شکسته شده و بستر فلوئوروژنیک ۴-methylumbelliferyl-ß-D-glucuronide که بسیار اختصاصی برای E.coli است، تشخیص هم‌زمان کلی‌فرم‌های کلی و E.coli ممکن است.

تغییر رنگ براث از زرد به آبی – سبز نشان‌دهنده وجود کولیفرم است. علاوه بر این، فلورسانس آبی در زیر نور ماورای بنفش موج بلند می‌کند که تشخیص سریع E. coli را امکان‌پذیر می‌کند. با افزودن تریپتوفان به محیط کشت، واکنش ایندول به‌راحتی با افزودن معرف Kocavs انجام می‌شود. تشکیل یک حلقه قرمز، وجود E.coli را تأیید می‌کند. سنتز آنزیم توسط ۱-isopropyl-ß-D-1-thio-galactopyranoside تقویت می‌شود و فعالیت gal-D-galactosidase را افزایش می‌دهد.

ترکیب معمول محیط کشت LMX براث

• تریپتوز ۵٫۰
• کلرید سدیم ۵٫۰
• سوربیتول ۱٫۰
• تریپتوفان ۱٫۰
• دی پتاسیم هیدروژن فسفات ۲٫۷
• پتاسیم دی هیدروژن فسفات ۲٫۰
• نمک سدیم لوریل سولفات ۰٫۱
• ۵-برومو -۴- کلرو -۳- ایندولیل -ß-D- گالاکتوپانوزید (X-GAL) 0.08
• ۴-methylum-belliferyl-ß-D-glucuronide (MUG)- به میزان ۰٫۰۵
• ۱-ایزوپروپیل-ß-D-1- تیو-گالاکتوپرانوزید (IPTG) 0.1

آماده‌سازی محیط کشت LMX براث

۱۷ گرم از محیط کشت را در ۱ لیتر آب تصفیه شده حل کنید. از حرارت استفاده کنید تا کاملاً حل شود. تا حدود ۲۰ میلی‌لیتر از مخلوط‌ها را درون لوله‌ها پر کنید. اتوکلاو به مدت ۱۵ دقیقه و با دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد برای استریل‌سازی انجام شود.