محیط کشت MRVP دارواش

مشخصات محیط کشت MR-VP دارواش :

محیط کشت MR-VP دارواش مناسب برای شناسایی باکتری های گرم منفی روده ای دارای دارای معرف MR-VP (متیل رد و ووگس پروسکار) به عنوان بخشی از آزمایش IMVIC استفاده می شود. این محیط از ترکیبات پپتیک، دکستروز، دی پتاسیم فسفات بهره میبرد و یک محیط کشت افتراقی می باشد.

پروتکل آزمایش MR (متیل رد) :

پس از انجام کشت و انکوباسیون 37 به مدت 48 ساعت، مقدار 0.6 میلی لیتر معرف MR را اضافه نموده و بر طبق جدول زیر نتیجه میگیریم.

ظهور رنگ قرمز: آزمایش مثبت (PH=4/4) ظهور رنگ نارنجی: آزمایش مثبت ضعیف (PH=5/3) ظهور رنگ زرد: آزمایش منفی (PH=5/3)

پروتکل آزمایش VP (ووگس پروسکار) :

این آزمایش بر اساس هیدرولیز اسیدپیروویک حاصل از متابولیسم گلوکز در باکتری ها می باشد. باکتری های کلبسیلا، انتروباکتر و سراشیا میتوانند از اسیدپیروویک تولید استوئین نمایند. این ماده در حضور اکسیژن و هیدروکسید پتاسیم 40% (پتاس) به دی استیل تبدیل میشود. آلفانفتول به عنوان کاتالیزور باعث تولید رنگ قرمز شود.

معرف ووگس پروسکار یک معرف دو قسمتی است. برای آزمایش ووگس پروسکار، بعد از انکوباسیون به ازای هر یک میلی‌لیتر از محیط کشت، 15 قطره محلول الکلی آلفا نفتول (محلول 5 درصد در اتانول 95%) و 10 قطره پتاس (40% در آب) اضافه می‌شود.

به لوله کشت داده شده و انکوبه شده حدود 6 میلی لیتر معرف آلفا نفتول (معرف A) و مقدار 2 میلی لیتر محلول پتاس (معرف B) اضافه کرده و خوب تکان می دهیم. اگر تغییر رنگ صورت نگرفت آن را به مدت سی دقیقه به حال خود گذاشته و طبق جدول زیر نتیجه گیری مینماییم.

آزمایش VP مثبت و اگر تغییر رنگی صورت نپذیرد، آزمایش VP منفی خواهد بود.