توضیحات

نشانگر وزن ملکولی (MW)

نشانگر اندازه وزن مولکولی که شامل  لدر پروتئین، لدر DNA یا لدر RNA  گفته می شود، مجموعه استانداردهایی است که برای شناسایی اندازه تقریبی یک مولکول روی ژل در طول الکتروفورز استفاده می شود، با استفاده از این اصل که مولکولی وزن با سرعت مهاجرت از طریق ژل نسبت معکوس دارد. به طور مثال هرچه وزن مولکولی بیشتر باشد سرعت حرکت آن کمتر خواهد بود.

نشانگر یا لدر پروتئین

لدر های پروتئینی حاوی مخلوطی از پروتئین های بسیار خالص شده با وزن مولکولی مشخص هستند. این لدرهای پروتئینی را بر روی ژل ها در کنار نمونه ها قرار می دهند تا به عنوان استاندارد ، برای تخمین وزن مولکولی مخلوط پروتئین های مجهول استفاده کنند. هنگامی که کار دستگاه به اتمام رسید پروتئین ها به صورت نوارهای جداگانه در ژل ظاهر می شوند.

راهنمایی برای انتخاب لدر پروتئینی مناسب شما

لدرهای پروتئینی با اندازه های مختلف پروتئینی ساخته شده و می توانند از قبل رنگ آمیزی شده یا بدون رنگ آمیزی باشند.

برای انتخاب مناسب تر بهتر است که اندازه تقریبی پروتئین های خود را با رنگ آمیزی آنتی بادی محاسبه کنید و سپس اقدام به خرید کنید.

انواع لدرهای پروتئینی

• لدرهای پروتئین فلورسنت در ژل های SDS-PAGE یا الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید (شامل بافر تریس گلیسین) استفاده می شود. آنها حاوی مخلوطی از پروتئین هایی هستند که از قبل با رنگ های فلورسنت رنگ آمیزی شده اند. در انتهای کار باید به باند ها نور با طول موج خاصی تابیده تا باند ها ظاهر شوند.
• لدر های پروتئین نوترکیب از پیش رنگ آمیزی شده و شامل سه باند مرجع با شدت بالا هستند: 25، 50 و 75 کیلو دالتون. از آنها برای شناسایی آسان تر وزن مولکولی پروتئین و توانایی نظارت بر مهاجرت در طول الکتروفورز استفاده می شود. بااین‌حال، تعیین اندازه با این نشانگرها چندان دقیق نیست.
• لدر های پروتئینی بدون رنگ فقط دارای رنگ آبی بروموفنولتا هستند و به نظارت بر پیشرفت کمک کنند همچنین تعیین‌کننده اندازه دقیق‌تری نسبت به لدر های از پیش رنگ شده هستند. اما زمانی‌که ژل در حال کار است، نمی‌توان آن ها را مشاهده کرد. به‌این‌ترتیب، برای تجسم باندها باید ژل رنگ‌آمیزی شود.

کاربرد لدر های پروتئینی

آنها طیف گسترده ای از کاربردها را در آزمایشگاه های علوم زیستی و بیوشیمی برای تجزیه و تحلیل پروتئین، مانند درک نقش ها و مکانیسم های عملکردی پروتئین ها و کشف پروتئین، دارند.

مورد استفاده در تکنیک های زیر:

• ژل الکتروفورز /SDS page
• وسترن بلات

شرایط نگه داری:

• تا 3 ماه در دمای 4 درجه سانتی گراد پایدار
• برای نگهداری طولانی مدت، در دمای -20 درجه سانتیگراد

مطالب مرتبط

None found