کیت الایزا میکروآلبومین

کیت الایزا میکرو آلبومین که با نام Microalbumin elisa kit نیز شناخته می‌شود مناسب اندازه‌گیری کمی آلبومین در حجم و مقدارهای بسیار کم در نمونه ادراری است. این کیت بر مبنای سنجش واکنش ایمونو آنزیماتیک روی فاز جامد طراحی شده است. در این سیستم از دو آنتی‌بادی که شاخص‌های آنتی‌ژنیک متمایزی را روی مولکول آلبومین شناسایی می‌کنند، استفاده شده است.

آلبومین در ادرار چقدر خطرناک است؟

تعیین غلظت آلبومین در مرحله میکرو آلبومین اوریا شاخص ارزشمندی در بررسی عوارض کلیوی بیماران مبتلا به دیابت ملیتوس بوده و می‌تواند در کنترل و پیگیری نفروپاتی دیابتیک مؤثر باشد. علاوه بر بیماری دیابت، آزمایش میکرو آلبومین اوریا در بررسی عملکرد کلیوی بانوان باردار، بیماران مبتلا به بیماری‌های قلبی – عروقی و همچنین پیگیری عوارض کلیوی مصرف برخی از داروها و هورمون‌ها و نفروتوکسین ها نیز حائز اهمیت می‌باشد.

میکرو آلبومین اوریا چیست؟

آلبومین با وزن مولکولی تقریبی kDa ۶۶ بیشترین پروتئین پلاسما را تشکیل می‌دهد. در افراد سالم مقدار دفع آلبومین در ادرار ناچیز است. درحالی‌که در بیماران مبتلا به نارسائی‌های کلیوی افرایش چشمگیری می‌یابد و می‌تواند به غلظت‌های بالاتر از (Proteinuria) ۲۰۰ Hg/ml برسد. قبل از بروز پروتئین اوریا (Proteinuria)، به میزان دفع آلبومین ادراری در غلظت‌های بین 20µg/min تا 200µg/min معادل 30mg/24h تا 300mg/24h که نشانگر شروع ضایعات کلیوی است T میکرو آلبومین اوریا (Micro-albuminuria) گفته می‌شود.

اصول اندازه‌گیری کیت الایزا میکرو آلبومین

جهت اندازه‌گیری آلبومین، ابتدا به حفره‌های پلی‌استایرن پوشیده شده با آنتی‌بادی پلی‌کلونال ضد آلبومین استانداردهای کنترل‌ها و نمونه‌های بیماران افزوده می‌شود. سپس آنتی‌بادی دوم ضد آلبومین که به آنزیم پراکسیداز (HRP) متصل شده است به حفره‌ها افزوده می‌شود. در حین انکوباسیون، آلبومین موجود در نمونه‌ها از طرفی به آنتی‌بادی‌های ضد آلبومین متصل به پلیت و از طرف دیگر به آنتی‌بادی دوم ضد آلبومین که به آنزیم پراکسیداز (HRP) متصل شده است وصل می‌شود. بقیه مواد از طریق تخلیه و شستشو از سیستم خارج می‌شوند. پس از انکوباسیون و شستشوی با افزودن TMB ، آنزیم رنگ آبی ایجاد می‌کند.

رنگ‌زایی واکنش آنزیماتیک با افزودن محلول متوقف‌کننده خاتمه‌یافته، رنگ آبی ایجاد شده به رنگ زرد تبدیل می‌شود. شدت رنگ به‌وسیله یک اسپکتروفتومتر مخصوص میکروپلیت در طول موج ۴۵۰ نانومتر اندازه‌گیری می‌شود. منحنی استاندارد بر اساس جذب توری غلظت هر استاندارد رسم می‌شود. غلظت آلبومین ادرار از روی منحنی استاندارد تعیین می‌شود. جذب نوری اندازه‌گیری شده با غلظت آلبومین موجود در نمونه نسبت معکوس دارد.