توضیحات

محتویات کیت HIV:

• مستر میکس    HIV)Real time):

پرایمر، پروب ، ۵۰ میلی مولار Mgcl2 ، Taq پلی مراز، ۱۰ میلی مولار dNTP ، بافر با آب

• کنترل مثبت ( ۵۰۰,۰۰۰ کپی/میلی لیتر)- کنترل منفی

مخلوط آماده سازی (HIV) :

• ۱۰ میکرولیتر مستر میکس Real time را به هر میکروتیوب اضافه کنید.
• ۵ میکرولیتر DNA ویروسی ، کنترل مثبت و کنترل منفی به هر میکروتیوب بیافزایید، به مدت ۱۰ ثانیه مخلوط و اسپین نمایید، برای ارزیابی کپی نامبر ویروس در نمونه خود ، ۲ تا serial dilutions ساخته و آن را برای فرآیند Real- time PCR خود تعریف کنید.

برنامه (RT-PCR(HIV:

سنتز CDNA:پنجاه درجه به مدت ۳۰ دقیقه

دناتوراسیون آغازی : ۹۵ درجه سانتی گراد به مدت ۵ دقیقه: در این مرحله Taq پلی مراز فعال شده و DNA ویروسی دناتوره می شود.

۴۵ سیکل : ۹۵ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ ثانیه ،۵۵  درجه سانتی گراد به مدت۱۰  ثانیه، ۷۲ درجه به مدت ۳۰ ثانیه

آشکار سازی فلورسنت: در green (FAM) channel و در۵۵ درجه سانتی گراد.

آنالیز Real-time:

اگر بعد از ۴۰  سیکل نمونه مثبت بود، آزمایش باید دوباره انجام شود.

مشاهده سایر محصولات مرتبط