کیت PCR برای بررسی کیفی HSV1.2-DNA

نکاتی در مورد HSV1 و HSV2:

Herpes simplex viruses که بیشتر با عنوان herpes شناخته می شود، به دو نوع تقسیم بندی می شود:

هرپس نوع 1 ( یا هرپس دهانی) و هرپس نوع 2 ( یا هرپس تناسلی).

که نوع 1 معروف تر است و شیوع بیشتری دارد که باعث ایجاد زخم هایی در دهان و لب ها می شود که گاهی به آن تب blisters یا زخم های سرد نیز گفته می شود.

محتویات کیت HSV1.2:

محتویات مستر میکس:

پرایمر، پروب ، 50 میلی مولار Mgcl2 ، Taq پلی مراز، 10 میلی مولار dNTP ، بافر و آب

کنترل مثبت – کنترل منفی

مخلوط آماده سازی کیت HSV1.2:

15 میکرولیتر مستر میکس را به هر میکروتیوب اضافه کنید.
5 میکرولیترDNA ویروسی ، کنترل مثبت و کنترل منفی به هر میکروتیوب بیافزایید، به مدت 10 ثانیه مخلوط و اسپین نمایید.

برنامه PCR :

دناتوراسیون آغازی : 95 درجه سانتی گراد: در این مرحله Taq پلی مراز فعال شده و DNA ویروسی دناتوره می شود.

40 سیکل : 95 درجه سانتی گراد به مدت 30 ثانیه ، 58 درجه سانتی گراد به مدت 20 ثانیه ، 72 درجه سانتی گراد به مدت 35 ثانیه

طویل سازی نهایی: در دمای 72 درجه سانتی گراد و به مدت 10 دقیقه باید انجام شود.

ژل الکتروفورز:

برای آشکار سازی محصولات PCR ، 1.5 تا 2 % ژل آگارز را در بافر TBE قرار داده و در ولتاژ 85-100 ولت برای مدت 60 دقیقه الکتروفورز کنید . باند های مخصوص 120 جفت بازی HSV1 و باند های 130 جفت بازی HSV2 می باشد.