توضیحات

کیت Real-time PCR Assay برای تشخیص ویروس پاپیلومای انسانی

HUMAN PAPILLOMA VIRUS – ASSAY

محتویات کیت:

• مستر میکس Real time :

پرایمر، پروب ، 50 میلی مولار Mgcl2 ، Taq پلی مراز، 10 میلی مولار dNTP ، بافر با آب

• کنترل مثبت ( 500,000 کپی/میلی لیتر)- کنترل منفی

مخلوط آماده سازی :

• 10 میکرولیتر مستر میکس Real time را به هر میکروتیوب اضافه کنید.
• 5 میکرولیتر DNA ویروسی ، کنترل مثبت و کنترل منفی به هر میکروتیوب بیافزایید، به مدت 10 ثانیه مخلوط و اسپین نمایید، برای ارزیابی کپی نامبر ویروس در نمونه خود ، 2 تا serial dilutions ساخته و آن را برای فرآیند Real- time PCR خود تعریف کنید.

برنامه Real-time PCR :

• دناتوراسیون آغازی : 95 درجه سانتی گراد به مدت 5 دقیقه: در این مرحله Taq پلی مراز فعال شده و DNA ویروسی دناتوره می شود.
• 40 سیکل : 95 درجه سانتی گراد به مدت 15 ثانیه ، 58 درجه سانتی گراد به مدت 10 ثانیه، 72 درجه سانتی گراد به مدت 15 ثانیه
• آشکار سازی فلورسنت: در green (FAM) channel و در 72 درجه سانتی گراد.

آنالیز Real-time  :

اگر بعد 38  سیکل نمونه مثبت بود، آزمایش باید دوباره انجام شود و با الکتروفورز 1.5 تا 2 % آگارز چک شود.

باندهایی که از 120 جفت باز بزرگتر باشند، HPV مثبت می باشند.

مشاهده سایر محصولات مرتبط