کیت Real-time PCR Assay برای تشخیص ویروس پاپیلومای انسانی

کیت Real-time PCR Assay برای تشخیص ویروس پاپیلومای انسانی

HUMAN PAPILLOMA VIRUS – ASSAY

 

ترکیبات کیت:

  • مستر میکس Real time :

پرایمر، پروب ، ۵۰ میلی مولار Mgcl2 ، Taq پلی مراز، ۱۰ میلی مولار dNTP ، بافر با آب

  • کنترل مثبت ( ۵۰۰,۰۰۰ کپی/میلی لیتر)- کنترل منفی

 

مخلوط آماده سازی :

  • ۱۰ میکرولیتر مستر میکس Real time را به هر میکروتیوب اضافه کنید.
  • ۵ میکرولیتر DNA ویروسی ، کنترل مثبت و کنترل منفی به هر میکروتیوب بیافزایید، به مدت ۱۰ ثانیه مخلوط و اسپین نمایید، برای ارزیابی کپی نامبر ویروس در نمونه خود ، ۲ تا serial dilutions ساخته و آن را برای فرآیند Real- time PCR خود تعریف کنید.

 

برنامه Real-time PCR :

  • دناتوراسیون آغازی : ۹۵ درجه سانتی گراد به مدت ۵ دقیقه: در این مرحله Taq پلی مراز فعال شده و DNA ویروسی دناتوره می شود.
  • ۴۰ سیکل : ۹۵ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ ثانیه ، ۵۸ درجه سانتی گراد به مدت ۱۰ ثانیه، ۷۲ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ ثانیه
  • آشکار سازی فلورسنت: در green (FAM) channel و در ۷۲ درجه سانتی گراد.

 

آنالیز Real-time  :

اگر بعد ۳۸  سیکل نمونه مثبت بود، آزمایش باید دوباره انجام شود و با الکتروفورز ۱٫۵ تا ۲ % آگارز چک شود.

باندهایی که از ۱۲۰ جفت باز بزرگتر باشند، HPV مثبت می باشند.

 

 

 

دیدگاهها

هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.

.فقط مشتریانی که این محصول را خریداری کرده اند و وارد سیستم شده اند میتوانند برای این محصول دیدگاه ارسال کنند.