توضیحات
محتویات کیت MTB:
- مستر میکس Real time :
پرایمر، پروب ، 50 میلی مولار Mgcl2 ، Taq پلی مراز، 10 میلی مولار dNTP ، بافر با آب
- کنترل مثبت ( 500,000 کپی/میلی لیتر)- کنترل منفی
مخلوط آماده سازی :
- 10 میکرولیتر مستر میکس Real time را به هر میکروتیوب اضافه کنید.
- 5 میکرولیتر DNA ویروسی ، کنترل مثبت و کنترل منفی به هر میکروتیوب بیافزایید، به مدت 10 ثانیه مخلوط و اسپین نمایید، برای ارزیابی کپی نامبر ویروس در نمونه خود ، 2 تا serial dilutions ساخته و آن را برای فرآیند Real- time PCR خود تعریف کنید.
برنامه PCR :
دناتوراسیون آغازی : 95 درجه سانتی گراد به مدت 5 دقیقه: در این مرحله Taq پلی مراز فعال شده و DNA ویروسی دناتوره می شود.
45 سیکل : 95 درجه سانتی گراد به مدت 15 ثانیه ،56 درجه سانتی گراد به مدت 10 ثانیه، 72 درجه سانتی گراد به مدت 30 ثانیه
آشکار سازی فلورسنت: در green (FAM) channel و در55 درجه سانتی گراد.
آنالیز Real-time :
اگر بعد از 40 سیکل نمونه مثبت بود، آزمایش باید دوباره انجام شود.
نکاتی در مورد بیماری زایی مایکوباکتریوم ها:
TB اثرات زیادی در بدن انسان از خود بروز می دهد، از جمله اثر روی استخوان ، و اثر روی سیستم اعصاب مرکزی ، و اثر روی خیلی از اندام های دیگر. اما تاثیر اولیه آن روی ریه و ایجاد بیمای های ریوی می باشد که با رسوب سلول های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس موجود در قطرات آئروسل روی سطوح alveolar ریه آغاز می شود.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.