از محیط Aeromonas Isolation Agar (Base) به عنوان یک ابزار تشخیصی مفید برای بررسی بیماری اسهال ممکن است استفاده شود. گونه های ائروموناس (Aeromonas ) به طور گسترده ای در آب ها و خاک زندگی میکنند که در انجا سبب بیماری ماهی ها و دوزیستان می شوند. علت اصلی عفونت های دستگاه گوارش توسط گونه های ائروموناس به دلیل مصرف آب آلوده میباشد. عصاره پپتون و مخمر، ترکیبات ضروری نیتروژن و کربنات و آمینو اسیدهای بلند زنجیرو همچنین ویتامین ها و دیگر مواد مغذی ضروری را فراهم می کند. نمک ها ، مواد معدنی و الکترولیت های ضروری محیط را فراهم می کنند و کلرید سدیم سبب حفظ تعادل اسمزی میشود. لاکتوز، سوربس، inositol و گزیلوز منابع کربن و انرژی محیط هستند. آمپی سیلین، نمکهای صفرایی و سدیم تیوگلیکولات باعث انتخابی شدن محیط می شود. بروموتیمول بلو و تیمول بلو به عنوان شناساگری برای مشخص کردن رنگ کلنی عمل می کنند.
فرمولاسیون محیط :
– Typical Formula* | – gm/litre |
– Proteose peptone | – ۵٫۰ |
– Yeast extract | – ۳٫۰ |
– L. Lysine monohydrochloride | – ۳٫۵ |
– L. Arginine monohydrochloride | – ۲٫۰ |
– Sorbitol | – ۳٫۰ |
– Inositol | – ۲٫۵ |
– Lactose | – ۱٫۵ |
– Xylose | – ۳٫۷۵ |
– Bile Salts No.3 | – ۳٫۰ |
– Sodium thiosulphate | – ۱۰٫۶۷ |
– Sodium chloride | – ۵٫۰ |
– Ferric ammonium citrate | – ۰٫۸ |
– Bromothymol blue | – ۰٫۰۴ |
– Thymol blue | – ۰٫۰۴ |
– Agar | – ۱۲٫۵ |
– Final pH 8.0 + 0.2 @ 25°C | – |
طرز تهیه کلی محیط های کشت :
همانطوریکه می دانید محیطهای کشت به سه دسته جامد ، نیمه جامد ، مایع تقسیم می شوند . محیطهای مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است . مثلاً حدود ( ۲/۰%) و محیط های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم وبالاخره محیط های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .
برای ساختن محیط های کشت باکتری، ما از پودر مخصوص که در شیشه های مربوطه قرار دارد، استفاده می کنیم. در روی این شیشه ها ترکیب محیط بطور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است . مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده ودر مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته اید اضافی نموده و آنرا کاملاً حل نمائید وسپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه پایه چراغ گازی حرارت میدهید ، تا زمان جوشیدن آنرا چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و بمدت یک دقیقه بجوشد پس از آنکه مایع بجوش آمد ، آنرا برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را میپوشانید وظرف را در اتوکلاو میگذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود . بعد از استریل کردن بگذارید تا خنک شود تا حدود c450– 40 . سپس در حالیکه ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آنرا با دست چپ کنار شعله خارج کردهاید ، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید وبعد درون پلیت های استریل شده بین cc20- 15 از محل محلول بریزید . بعد پلیت ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند وازتکان دادن آن خودداری نمائید وپس از جامد شدن محیطهای کشت نوترینت آگار را جمع کرده ودر c370 بمدت ۲۴ ساعت قرار دهید . اگر محیط ها آلوده نشده باشند آنها را از c370 بیرون آورده و در یخچال ۴ درجه سانتی گراد قرار میدهید .
طرز ساختن سایر محیطهای کشت، همینطور میباشد منتهی بعضی از محیطهای جامد در لوله مستقیم، پس از جوشاندن ریخته شده و بعد استریل میشوند که این محیطها را پس از استریل شدن، به طور ایستاده میگذاریم مثل محیط SIM و یا کج میگذاریم مثل محیط TSI تا سرد شوند .
برای ساختن محیط مایع (براث) پس از جوشاندن، محیط را در لوله ها تقسیم میکنیم و سپس با پنبهای درب آنها را مسدود کرده و جهت استریل داخل اتوکلاو قرار میدهیم .
لینک های مفید:
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.