محیط کشت AK Agar No.2 یا محیط کشت Arret and Kirshbau-AK Agar # 2- Sporulating Agar برای تولید اسپور از باسیلوس سوبتیلیس توصیه می شود و همچنین برای تشخیص پنی سیلین و سایر آنتی بیوتیک های موجود در شیر و محصولات لبنی نیزاستفاده می شود. تشخیص پنی سیلین و سایر آنتی بیوتیک های موجود در شیر اهمیت زیادی در صنعت لبنیات دارد. این کار با روش تست پنی سیلین شیر انجام می شود. محیط کشت AK Agar No.2 برای تولید اسپور، باسیلوس سوبتیلیس (Bacillus subtilis ATCC 6633 ) استفاده می شود که در روش آزمون Penicillin Milk) مورد استفاده قرار می گیرد. محیط کشت AK Agar به دلیل وجود عصاره مخمر، عصاره گوشت گاو، هضم کننده ژلاتین پانکراس و آنزیم هیدرولیز کننده کازئین علاوه بر منبع ویتامین ها و اسید آمینه های ضروری، برای محیط بسیار مغذی هستند. سولفات منگنز این محیط اسپوراسیون را تحریک می کند.
-
فرمولاسیون محیط کشت AK Agar No.2
Pancreatic digest of gelatin ۶٫۰۰۰
Casein enzymic hydrolysate ۴٫۰۰۰
Yeast extract ۳٫۰۰۰
Beef extract ۱٫۵۰۰
Dextrose ۱٫۰۰۰
Manganous sulphate ۰٫۳۰۰
Agar ۱۵٫۰۰۰
Final pH ( at 25°C) 6.6±۰٫۲
طرز تهیه کلی محیط های کشت :
همانطوریکه می دانید محیطهای کشت به سه دسته جامد ، نیمه جامد ، مایع تقسیم می شوند . محیطهای مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است . مثلاً حدود ( ۲/۰%) و محیط های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم وبالاخره محیط های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .
برای ساختن محیط های کشت باکتری، ما از پودر مخصوص که در شیشه های مربوطه قرار دارد، استفاده می کنیم. در روی این شیشه ها ترکیب محیط بطور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است . مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده ودر مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته اید اضافی نموده و آنرا کاملاً حل نمائید وسپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه پایه چراغ گازی حرارت میدهید ، تا زمان جوشیدن آنرا چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و بمدت یک دقیقه بجوشد پس از آنکه مایع بجوش آمد ، آنرا برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را میپوشانید وظرف را در اتوکلاو میگذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود . بعد از استریل کردن بگذارید تا خنک شود تا حدود c450– 40 . سپس در حالیکه ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آنرا با دست چپ کنار شعله خارج کردهاید ، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید وبعد درون پلیت های استریل شده بین cc20- 15 از محل محلول بریزید . بعد پلیت ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند وازتکان دادن آن خودداری نمائید وپس از جامد شدن محیطهای کشت نوترینت آگار را جمع کرده ودر c370 بمدت ۲۴ ساعت قرار دهید . اگر محیط ها آلوده نشده باشند آنها را از c370 بیرون آورده و در یخچال ۴ درجه سانتی گراد قرار میدهید .
طرز ساختن سایر محیطهای کشت، همینطور میباشد منتهی بعضی از محیطهای جامد در لوله مستقیم، پس از جوشاندن ریخته شده و بعد استریل میشوند که این محیطها را پس از استریل شدن، به طور ایستاده میگذاریم مثل محیط SIM و یا کج میگذاریم مثل محیط TSI تا سرد شوند .
برای ساختن محیط مایع (براث) پس از جوشاندن، محیط را در لوله ها تقسیم میکنیم و سپس با پنبهای درب آنها را مسدود کرده و جهت استریل داخل اتوکلاو قرار میدهیم .
لینک های مفید:
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.