توضیحات

هیستون H2AX ؛ همچنین با نام H2a/x و هیستون H2A.X نیز شناخته می‌شود توسط ژن H2AFX  در انسان کدگذاری می‌شود. هیستون‌ها پروتئین‌های هسته‌ای بسیار حفاظت شده‌ای هستند که مسئول ساختار نوکلئوزومی کروماتین در یوکاریوت‌ها هستند. آنها در تنظیم رونویسی، ترمیم DNA، همانندسازی DNA و ثبات کروموزومی نقش اساسی دارند. دسترسی به DNA از طریق مجموعه پیچیده‌ای از تغییرات پس از ترجمه هیستون‌ها که کد هیستون نیز نامیده می‌شود و بازسازی نوکلئوزومی تنظیم می‌شود.

دو مولکول از هر یک از چهار هیستون هسته (H2A، H2B، H3، و H4) یک اکتامر را تشکیل می‌دهند که باعث ایجاد DNA در واحدهای تکراری به نام نوکلئوزوم می‌شود. هیستون H2A.X یک عضو متغیر از خانواده هیستون‌های H2A می‌باشد که با یک توالی کربوکسی پایانی منحصربه‌فرد از سایر هیستون‌های H2A متمایز می‌شود. این توالی منحصربه‌فرد در طول تکامل یوکاریوتی بسیار محافظت شده است و به‌سرعت توسط ATM یا ATR در سرین 139 در پستانداران در پاسخ به شکستگی‌های دو رشته‌ای DNA فسفریله می‌شود.

فسفوریلاسیون H2A.X در تشکیل کمپلکس ترمیم پایدار در محل آسیب DNA مهم است. فسفوریلاسیون H2A.X در تشکیل کمپلکس ترمیم پایدار در محل آسیب DNA مهم است. این فسفوریلاسیون یک پاسخ بسیار سریع به آسیب DNA است که در عرض یک دقیقه پس از قرارگرفتن در معرض پرتوهای یونیزان رخ می‌دهد.

کاربرد

Anti-phospho-Histone H2A.X (Ser139)، یک آنتی‌بادی مونوکلونال خرگوشی نوترکیب است که به طور خاص فسفو هیستون H2AX (ser139) را هدف قرار می‌دهد و برای استفاده در سنجش مهار پپتید، وسترن بلاتینگ، تجزیه‌وتحلیل ایمونوهیستوشیمی (پارافین) مناسب می‌باشد.

برای مثال:

• تجزیه‌وتحلیل ایمونوهیستوشیمی (پارافین): رقت 1:100 از مقدار نمونه، فسفو هیستون H2A.X (Ser139) را در بخش‌های بافت بیضه انسان شناسایی کرد.
• تجزیه‌وتحلیل ایمونوسیتوشیمی: رقت 1:100 از مقدار نمونه، فسفو هیستون H2A.X (Ser139) در HeLa پوشانده شده با Staurosporin را شناسایی کرد.
• تجزیه‌وتحلیل مهار پپتید: رقت 1:1000 از مقدار نمونه با لیز سلولی Jurkat، پوشیده شده با استاوروسپورین برای تجزیه‌وتحلیل بلوک پپتیدی استفاده شد.

ذخیره‌سازی و پایداری

• محصول را در دمای 2-8 درجه سانتی‌گراد نگهداری کنید.
• قبل از بازکردن، ویال‌ها را میکرو سانتریفیوژ کنید.
• آنتی‌بادی‌های بازشده را می‌توان در دمای 20- درجه سانتیگراد برای مدت طولانی نگهداری کرد.
• از انجماد و ذوب مکرر خودداری کنید.