محیط کشت Antibiotic Medium No. 1 (Penassay Seed Agar) یا روش سنجش آنتی بیوتیکی متوسط شماره ۱ در آزمایش میکروبیولوژیکی ß لاکتام و سایر آنتی بیوتیک ها استفاده می شود. این رسانه ها مطابق با پیش بینی های دقیق در فارماکوپه های مختلف و توسط FDA تهیه می شوند. برای تعیین توانایی یک آنتی بیوتیک برای از بین بردن یا مهار رشد میکروارگانیسم های زنده یک سنجش ساخته شده است. آزمایشات بیولوژیکی مناسب ترین وسیله برای انجام یک سنجش است ، زیرا کاهش فعالیت ضد میکروبی یک آنتی بیوتیک خاص تغییراتی را نشان می دهد که معمولاً با روش های شیمیایی نمایش داده نمی شود. آزمایش حساسیت ضد باکتریایی ممکن است با روش های رقیق سازی (توربیدیمتری) یا انتشار انجام شود. انتخاب روش شناسی غالباً مبتنی بر عوامل بسیاری از جمله سهولت نسبی عملکرد ، انعطاف پذیری و استفاده از دستگاه های خودکار یا نیمه خودکار برای تشخیص هویت و آزمایش حساسیت است. گروو و راندال در رساله جامع خود در مورد سنجش های آنتی بیوتیکی، آنالیزها و محیط های آنتی بیوتیکی را روشن کرده اند.
فرمولاسیون محیط کشت Antibiotic Medium No. 1 (Penassay Seed Agar)
- Ingredients Gms / Litre
Peptone ۶٫۰۰۰
Tryptone ۴٫۰۰۰
Yeast extract ۳٫۰۰۰
HM peptone B # ۱٫۵۰۰
Dextrose (Glucose) ۱٫۰۰۰
Agar ۱۵٫۰۰۰
Final pH ( at 25°C) 6.6±۰٫۲
طرز تهیه کلی محیط های کشت :
همانطوریکه می دانید محیطهای کشت به سه دسته جامد ، نیمه جامد ، مایع تقسیم می شوند . محیطهای مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است . مثلاً حدود ( ۲/۰%) و محیط های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم وبالاخره محیط های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .
برای ساختن محیط های کشت باکتری، ما از پودر مخصوص که در شیشه های مربوطه قرار دارد، استفاده می کنیم. در روی این شیشه ها ترکیب محیط بطور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است . مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده ودر مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته اید اضافی نموده و آنرا کاملاً حل نمائید وسپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه پایه چراغ گازی حرارت میدهید ، تا زمان جوشیدن آنرا چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و بمدت یک دقیقه بجوشد پس از آنکه مایع بجوش آمد ، آنرا برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را میپوشانید وظرف را در اتوکلاو میگذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود . بعد از استریل کردن بگذارید تا خنک شود تا حدود c450– 40 . سپس در حالیکه ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آنرا با دست چپ کنار شعله خارج کردهاید ، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید وبعد درون پلیت های استریل شده بین cc20- 15 از محل محلول بریزید . بعد پلیت ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند وازتکان دادن آن خودداری نمائید وپس از جامد شدن محیطهای کشت نوترینت آگار را جمع کرده ودر c370 بمدت ۲۴ ساعت قرار دهید . اگر محیط ها آلوده نشده باشند آنها را از c370 بیرون آورده و در یخچال ۴ درجه سانتی گراد قرار میدهید .
طرز ساختن سایر محیطهای کشت، همینطور میباشد منتهی بعضی از محیطهای جامد در لوله مستقیم، پس از جوشاندن ریخته شده و بعد استریل میشوند که این محیطها را پس از استریل شدن، به طور ایستاده میگذاریم مثل محیط SIM و یا کج میگذاریم مثل محیط TSI تا سرد شوند .
برای ساختن محیط مایع (براث) پس از جوشاندن، محیط را در لوله ها تقسیم میکنیم و سپس با پنبهای درب آنها را مسدود کرده و جهت استریل داخل اتوکلاو قرار میدهیم .
لینک های مفید:
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.