محیط کشت BHIB براث – عصاره قلب و مغز

محیط کشت عصاره قلب و مغز براث (Brain Heart Infusion Broth) که به نام محیط BHIB نیز شناخته می‌شود، محیطی عمومی و بسیار مغذی جهت کشت انواع باکتری‌های سخت رشد و آسان رشد و نیز باکتری­های هوازی و بی‌هوازی می‌باشد. برای ساخت محیط کشت میکروبی BHIB تکه‌های بافت مغز را به براث عصاره گوشت اضافه می‌کنند. محیط کشت میکروبی BHIB برای کشت طیف گسترده‌ای از میکروارگانیسم‌ها نظیر باکتری، مخمر و قارچ‌ها به کار می‌رود. این محیط کشت در مقیاس ۰٫۵ ml  در تیوب برای کشت باکتریایی استفاده می‌شود که برای آماده‌سازی تلقیح برای microdilution minimal inhibitory concentration (MIC) و تست‌های شناسایی به کار می‌رود. زمانی که تعداد زیادی سلول در یک حجم کم از این محیط تلقیح می‌شوند، باکتری‌ها به‌سرعت به فاز stationary رشد خود می‌رسند. همچنین استفاده از این محیط در مقیاس ۵ml  در هر تیوب برای تست‌های حساسیت سنجی میکروبی به کار می‌رود. این حجم و همچنین تیوب‌های ۸ ml برای اهداف general  کاربرد دارند.

آماده‌سازی محیط BHIB 

• ۳۷ گرم از پودر محیط را در یک لیتر آب مقطر حل کرده و کاملاً مخلوط کنید.
• محیط کشت را در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید.

فرایند آزمایش

• چنانچه نمونه مایع باشد، به کمک پیپت استریل ۲-۱ قطره از نمونه را به لوله حاوی محیط کشت استریل تلقیح کنید.
• در مواردی که به‌وسیله سواپ نمونه‌گیری انجام می‌شود، پس از کشت دادن سواپ بر روی محیط جامد در پلیت، سواپ را به داخل لوله حاوی محیط مایع قرار داده و گرما گذاری کنید.

نتیجه و تفسیر محیط BHIB

در صورت رشد باکتری‌ها در این محیط، پس از گرماگذاری، کدورت ایجاد می‌شود. پس از این مرحله باید رنگ‌آمیزی گرم و کشت در محیط­های مناسب مانند Trypticase Soy Agar، ۵% Sheep Blood Agar، Chocolate Agar،Agar EMB و MacConkey Agar انجام شود. برای کشت باکتری‌های بی‌هوازی باید از سیستم بی‌هوازی گاز پک استفاده شود.

کنترل کیفی محیط BHIB

• ظاهر پودر: کهربایی روشن، یکدست و پودری
• ظاهر محیط آماده: محلول کهربایی روشن و شفاف
• نتیجه کشت باکتری پس از گرماگذاری در دمای ۲±۳۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۷ روز تحت شرایط اتمسفری مناسب (کاندیدا آلبیکنس در دمای ۲۷-۲۰ درجه سانتی‌گراد)

نکات تکمیلی

• در صورت بالابودن مقدار نمک کلرید سدیوم در این محیط (۶/۵%) می‌توان از این محیط برای افتراق بین انتروکوک‌ها و استرپتوکوک‌ها پس از ۴۲-۴۸ ساعت در محیط مایع حاوی ۶/۵% نمک رشد می‌کنند و سایر استرپتوکوک‌های گروه D غیر انتروکوکی در این محیط پس از ۴۸ ساعت نیز رشد نخواهند کرد.
• طبق استاندارد ایزو ۱-۶۸۸۸، با افزودن پلاسمای خرگوش به این محیط، می‌تواند از آن برای تأیید حضور استافیلوکوک‌های کوآگولاز مثبت در مواد غذایی و لبنی استفاده کرد.
• پودر محیط داخل قوطی کاملاً دربسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتی‌گراد و محیط آماده در دمای ۸-۲ درجه سانتی‌گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.