محیط کشت میکروبی Buffered Listeria Enrichment Broth Base

محیط کشت میکروبی Buffered Listeria Enrichment Broth Base برای غنی سازی و جداکردن لیستریا مونوسیتوژنز( Listeria monocytogenes ) توصیه می شود با توجه به افزودن داروهای ضد میکروبی، به محیط یک محیط انتخابی است. لیستریا مونوسیتوژنز تنها گونه از جنس لیستریا است که باعث ایجاد لیستریوز در انسان می شود، اما گاهی اوقات L. seeligeri، L. welshimeri و L. ivanovii  هم با بیماری های انسان مرتبط هستند. شواهد میکروبیولوژیکی و اپیدمیولوژیک نشان دهنده پراکندگی و اپیدمی لیستریوز است که نشان دهنده مسیر اصلی انتقال از طریق مصرف مواد غذایی آلوده به لیستریا مونوسیتوژنز است. گونه های لیستریا در محدوده pH 4.4-9.6  رشد می کنند گونه های لیستریا میکروآروفیلی، گرم مثبت، میله ایی منظم، کوتاه و دارای حرکت هستند ، تحرک بیشتر در دمای ۲۰ درجه سانتی گراد دیده می شود. آنزیم کازئین هیدرولیزات و هضم کننده پاپایا از غذاهای سویا، اسیدهای آمینه و دیگر مواد نیتروژن دار را فراهم می کنند. دکستروز منبع انرژی است و سدیم پیروات اسید در احیای ارگانیسم ها نقش دارد. فسفات ها ظرفیت بافر را فراهم می کنند و کلرید سدیم تعادل اسمزی را حفظ می کند. عصاره ی مخمر حاوی ویتامین B است . Cycloheximide مانع از رشد قارچ های ساپروفیت می شود. اسید نالیدیکسیک رشد ارگانیسم های گرم منفی را مهار می کند، و acriflavin رشد میکروارگانیسم های گرم مثبت را مهار می کند

• فرمولاسین محیط کشت میکروبی Buffered Listeria Enrichment Broth Base:

• نحوه نگهداری از محیط :

دمای زیر ۳۰ درجه سانتیگراد را در ظرف محکم وبسته نگهداری شود و محیط تهیه شده در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد نگه دارید.

طرز تهیه کلی محیط های کشت :

همانطوریکه می دانید محیطهای کشت به سه دسته جامد ، نیمه جامد ، مایع تقسیم می شوند . محیطهای مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است . مثلاً حدود ( ۲/۰%) و محیط های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم وبالاخره محیط های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .

برای ساختن محیط های کشت باکتری، ما از پودر مخصوص که در شیشه های مربوطه قرار دارد، استفاده می‌ کنیم. در روی این شیشه ها ترکیب محیط بطور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است . مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده ودر مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته اید اضافی نموده و آنرا کاملاً‌ حل نمائید وسپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید ، تا زمان جوشیدن آنرا چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و بمدت یک دقیقه بجوشد پس از آنکه مایع بجوش آمد ، آنرا برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید وظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود . بعد از استریل کردن بگذارید تا خنک شود تا حدود c45⁰– 40 . سپس در حالیکه ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آنرا با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید ، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید وبعد درون پلیت های استریل شده بین ^cc20- 15 از محل محلول بریزید . بعد پلیت ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند وازتکان دادن آن خودداری نمائید وپس از جامد شدن محیطهای کشت نوترینت آگار را جمع کرده ودر c37⁰ بمدت ۲۴ ساعت قرار دهید . اگر محیط ها آلوده نشده باشند آنها را از c37⁰ بیرون آورده و در یخچال ۴ درجه سانتی گراد قرار می‌دهید .

طرز ساختن سایر محیطهای کشت، همینطور می‌باشد منتهی بعضی از محیطهای جامد در لوله مستقیم، پس از جوشاندن ریخته شده و بعد استریل می‌شوند که این محیطها را پس از استریل شدن، به طور ایستاده می‌گذاریم مثل محیط SIM و یا کج می‌گذاریم مثل محیط TSI تا سرد شوند .

برای ساختن محیط مایع (براث) پس از جوشاندن، محیط را در لوله‌ ها تقسیم می‌کنیم و سپس با پنبه‌ای درب آنها را مسدود کرده و جهت استریل داخل اتوکلاو قرار می‌دهیم .

محیط کشت میکروبی Buffered Listeria Enrichment Broth Base ایبرسکو را به سبد خود اضافه کنید و یا از برندهای وارداتی کندا (هیسپان) لب ، کیولب و مرک استعلام نمایید.

لینک های مفید:

• مشاهده محصولات گروه میکروبی
• محصولات سلولی