توضیحات

محیط کشت Coagulase Mannitol Agar برای جداسازی اولیه و تمایز استافیلوکوک های بیماری زا از نمونه های بالینی یا برای طبقه بندی کشتهای خالص توصیه می شود. محیط کشت Coagulase Mannitol Agar برای جداسازی استافیلوکوکوس اورئوس از نمونه های بالینی و تمایز S.aureus از گونه های دیگر بر اساس تولید کوآگولاز و تخمیر مانیتول استفاده می شوند. چاپمن برای اولین بار محیطی را برای جداسازی انتخابی و تمایز استافیلوکوکی معرفی کرد. Escherichia coli مانیتول را تخمیر می کند و ممکن است ضعف انعقادی مثبت داشته باشد. تولید کوآگولاز به وجود قند تخمیر شده مانند مانیتول در این مورد بستگی دارد. همچنین به وجود یک عامل پروتئین در تزریق HI و پلاسمای خون بستگی دارد . هنگامی که مانیتول تخمیر می شود ، pH محیط اطراف کلنی های کوآگولازمثبت منعقد می شود. این کاهش pH با تغییر رنگ نشانگر بنفش بروموکروزول دیده می شود که به رنگ زرد در می آید. ناحیه ای مات از پلاسما منعقد شده در اطراف مستعمرات ارگانیسم های مثبت انعقادی تشکیل می شود. گونه های منفی کوآگولاز ممکن است مانیتول را تخمیر کرده و یک منطقه زرد در اطراف کلنی ها ایجاد کنند اما یک منطقه مات تشکیل نمی شود.

طرز تهیه کلی محیط های کشت :

همانطوریکه می دانید محیطهای کشت به سه دسته جامد ، نیمه جامد ، مایع تقسیم می شوند . محیطهای مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است . مثلاً حدود ( ۲/۰%) و محیط های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم وبالاخره محیط های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .

برای ساختن محیط های کشت باکتری، ما از پودر مخصوص که در شیشه های مربوطه قرار دارد، استفاده می‌ کنیم. در روی این شیشه ها ترکیب محیط بطور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است . مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده ودر مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته اید اضافی نموده و آنرا کاملاً‌ حل نمائید وسپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید ، تا زمان جوشیدن آنرا چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و بمدت یک دقیقه بجوشد پس از آنکه مایع بجوش آمد ، آنرا برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید وظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود . بعد از استریل کردن بگذارید تا خنک شود تا حدود c45⁰– 40 . سپس در حالیکه ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آنرا با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید ، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید وبعد درون پلیت های استریل شده بین ^cc20- 15 از محل محلول بریزید . بعد پلیت ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند وازتکان دادن آن خودداری نمائید وپس از جامد شدن محیطهای کشت نوترینت آگار را جمع کرده ودر c37⁰ بمدت ۲۴ ساعت قرار دهید . اگر محیط ها آلوده نشده باشند آنها را از c37⁰ بیرون آورده و در یخچال ۴ درجه سانتی گراد قرار می‌دهید .

طرز ساختن سایر محیطهای کشت، همینطور می‌باشد منتهی بعضی از محیطهای جامد در لوله مستقیم، پس از جوشاندن ریخته شده و بعد استریل می‌شوند که این محیطها را پس از استریل شدن، به طور ایستاده می‌گذاریم مثل محیط SIM و یا کج می‌گذاریم مثل محیط TSI تا سرد شوند .

برای ساختن محیط مایع (براث) پس از جوشاندن، محیط را در لوله‌ ها تقسیم می‌کنیم و سپس با پنبه‌ای درب آنها را مسدود کرده و جهت استریل داخل اتوکلاو قرار می‌دهیم .

لینک های مفید:

• مشاهده محصولات گروه میکروبی
• محصولات سلولی