توضیحات

محیط کشت میکروبی GYEP آگار که به نام محیط کشت گلوکز یست اکسترکت پپتون آگار (Glucose Yeast Extract Peptone Agar) نیز شناخته می‌شود، برای جداسازی مخمرها از نمونه‌های خاک به کار می‌رود. این یک محیط کشت فوق غنی شده می‌باشد که ممکن است برای سایر ارگانیسم‌های سخت‌پسند نیز به کار رود. محیط کشت Glucose Yeast Extract Peptone (GYEP) Agar آماده شده را در دمای زیر ۸ درجه سانتی‌گراد نگه داشته و از تابش مستقیم نور محافظت کنید. پودر دهیدراته را در محیطی خشک و در ظرفی با درب محکم و در دمای ۲ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد نگه‌داری کنید. بافت حیوانی هضم شده موجود در این محیط کشت، مواد مغذی نیتروژن‌دار بخصوص آمینواسیدها و پپتیدها ا فراهم می‌کند. عصاره مخمر کمپلکس ویتامین B را فراهم می‌کند. دکستروز منبعی در دسترس برای انرژی و همچنین منبعی خوب از کربوهیدرات‌های مورد مصرف مخمرها فراهم می‌کند.

ترکیبات محیط کشت Glucose Yeast Extract Peptone Agar

• بافت حیوانی هضم شده پپتیک ۱۰٫۰ گرم بر لیتر
• عصاره مخمر ۵٫۰ گرم بر لیتر
• دکستروز ۲۰٫۰ گرم بر لیتر
• آگار ۱۵٫۰ گرم بر لیتر
• PH نهایی در دمای ۲۵ درجه سانتی‌گراد باید حدود ۷٫۰ باشد.

ظاهر محیط کشت GYEP آگار

• پودری همگن به رنگ زرد روشن
• حالت ژله‌ای با قوام

طرز تهیه کلی محیط‌های کشت

همان‌طوری که می‌دانید محیط‌های کشت به سه دسته جامد، نیمه جامد، مایع تقسیم می‌شوند. محیط‌های مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است. مثلاً حدود (۲/۰%) و محیط‌های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم و بالاخره محیط‌های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .

برای ساختن محیط‌های کشت باکتری، ما از پودر مخصوص که در شیشه‌های مربوطه قرار دارد، استفاده می‌کنیم. در روی این شیشه‌ها ترکیب محیط به طور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است. مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده و در مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته‌اید اضافی نموده و آن را کاملاً حل نمایید و سپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه‌پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید، تا زمان جوشیدن آن را چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و به مدت یک دقیقه بجوشد پس از آنکه مایع بجوش آمد، آن را برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید و ظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود. بعد از استریل کردن بگذارید تا خنک شود تا حدود c45⁰– 40 . سپس درحالی‌که ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آن را با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید و بعد درون پلیت‌های استریل شده بین ^cc20- 15 از محل محلول بریزید . بعد پلیت‌ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند و از تکان دادن آن خودداری نمایید و پس از جامد شدن محیط‌های کشت نوترینت آگار را جمع کرده و در c37⁰ به مدت ۲۴ ساعت قرار دهید. اگر محیط‌ها آلوده نشده باشند آنها را از c37⁰ بیرون آورده و در یخچال ۴ درجه سانتی‌گراد قرار می‌دهید . طرز ساختن سایر محیط‌های کشت، همین‌طور می‌باشد منتهی بعضی از محیط‌های جامد در لوله مستقیم، پس از جوشاندن ریخته شده و بعد استریل می‌شوند که این محیط‌ها را پس از استریل شدن، به طور ایستاده می‌گذاریم مثل محیط SIM و یا کج می‌گذاریم مثل محیط TSI تا سرد شوند . برای ساختن محیط مایع (براث) پس از جوشاندن، محیط را در لوله‌ها تقسیم می‌کنیم و سپس با پنبه‌ای درب آنها را مسدود کرده و جهت استریل داخل اتوکلاو قرار می‌دهیم.