توضیحات

IPTG با نام ایزوپروپیل بتا – دی -۱- تیوگالاکتوپیرانوزید با فرمول مولکولی H₁₈O₅S به‌عنوان معرفی است که معمولاً در زیست‌شناسی مولکولی استفاده می‌شود.

IPTG به سبب شباهت به مولکول‌های زیستی، جذب سلول‌های باکتری E.coli می‌شود این امر در غلظت‌های کم به کمک لاکتوز پرماز و در غلظت‌های بالا به طور مستقل انجام می‌شود.

کاربرد و مکانیسم

• تنظیم فعالیت رونویسی و بیان پروتئین با خاصیت القاکنندگی:

پروموتر لاک القایی (lacz)، یکی از رایج‌ترین پروموترهای مورداستفاده برای بیان پروتئین هترولوگ در E.coli می‌باشد. IPTG در حال حاضر کارآمدترین القاکننده مولکولی برای تنظیم فعالیت رونویسی این پروموتر است.

IPTG یک معرف شیمیایی شبیه به آلولاکتوز می‌باشد. (ایزومر لاکتوز که با ورود لاکتوز به سلول‌ها تشکیل می‌شود.) که یک رپرسور (repressor) را از اپرون (Operon) لاک حذف کرده تا بیان ژن را القا کند و شروع رونویسی را به دست بگیرد. مکانیسم آن به این صورت می‌باشد که IPTG به رپرسور lac متصل شده و رپرسور تترامری را از اپراتور lac به روش آلوستریک آزاد می‌کند، در نتیجه امکان رونویسی ژن‌ها در اپرون lac، مانند ژن کدکننده بتا – گالاکتوزیداز را فراهم می‌کند.

• خاصیت شناساگر بودن

IPTG همراه با X-gal می‌تواند کلنی‌هایی که با پلاسمید نوترکیب به‌جای پلاسمید غیر نوترکیب جابه‌جاشده‌اند را در آزمایش‌های شبیه‌سازی شناسایی کند.

نکات تکمیلی

• به‌صورت پودر لیوفلیزه در دمای 4 درجه سانتی‌گراد تا 5 سال پایدار می‌باشد.

مطالب مرتبط

None found