محیط کشت مک کانکی براث – MacConkey

محیط کشت میکروبی MacConkey Broth که به نام محیط کشت مک کانکی براث نیز شناخته می‌شود، مناسب برای تشخیص باکتری‌های COLIFORM در شیر و آب به کار می‌رود. این محیط کشت مطابق با  USP/EP/JP Requirements  می‌باشد و برای اهداف تشخیصی و سایر وضعیت‌های مربوط به انسان کاربردی ندارد. این محیط کشت توسط Harmonized USP/EP/JP برای غنی‌سازی انتخابی محیط اشریشیا کلی از نمونه‌های غیر استریل به کار می‌رود. مطابق با Harmonized USP/EP/JP کاربرد اختصاصی دارد.پپتون ژلاتین، نیتروژن را فراهم می‌کند، در حالیکه لاکتوز یک کربوهیدرات قابل تخمیر می‌باشد. Ox bile به‌عنوان عامل مهارکننده رشد ارگانیسم‌های گرم مثبت به کار می‌رود و بروکروزول بنفش نقش اندیکاتور PH را بازی می‌کند. تغییر رنگ محیط از بنفش به زرد نشان‌دهنده رشد و تحمل bile و ارگانیسم تخمیرکننده لاکتوز مثل اشریشیا کلی می‌باشد. بر اساس Harmonized USP/EP/JP، محیط کشت میکروبی MacConkey Broth به‌عنوان محیط کشت غنی انتخابی، باساب کالچر بر روی محیط کشت MacConkey Agar انجام شده است.

آماده‌سازی محیط مک کانکی براث

• ۳۵ گرم از پودر محیط را در یک لیتر آب مقطر حل کنید.
• محیط کشت را در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید.
• محیط کشت را در لوله‌های آزمایش حاوی لوله دورهام تقسیم کنید.

شرایط نگهداری مک کانکی براث

پودر محیط داخل قوطی کاملاً دربسته و در دمای زیر ۳۵ درجه سانتی‌گراد و محیط آماده در دمای ۸-۲ درجه سانتی‌گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.

فرآیند آزمایش

• باتوجه‌به نوع نمونه و پروتکل استاندارد مربوطه، نمونه را آماده کرده و به محیط کشت تلقیح کنید.
• لوله‌های تلقیح شده را در دمای ۲±۳۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۲۴-۱۸ ساعت در شرایط هوازی گرماگذاری کنید.

نتیجه و تفسیر مک کانکی براث

باکتری‌های تخمیرکننده لاکتوز، لاکتوز موجود در محیط را تخمیر کرده و اسید تولید می‌کنند که در نتیجه رنگ محیط کشت زرد خواهد شد. گاز تولید شده در اثر این تخمیر، در لوله‌های دورهام تجمع می‌یابد. باکتری‌های غیرتخمیرکننده لاکتوز در اثر رشد کدورت ایجاد کرده؛ ولی قادر به تولید اسید و گاز نمی‌باشند.

تولید گاز و تجمع آن در لوله دورهام و نیز تولید اسید که باعث زرد شدن رنگ محیط می‌شود می­تواند نشان از حضور باکتری‌های کلیفرم و E. coli در نمونه باشد. تولید اسید، بدون تولید گاز، می­تواند نشانه حضور کلیفرم ها، و عدم حضور E. coli باشد.

نکات تکمیلی مک کانکی براث

• از محیط کشت مک کانکی براث، همچنین برای شناسایی سریع باکتری‌های E.coli تولیدکننده شیگاتوکسین در نمونه‌های مدفوعی استفاده می‌شود.

کنترل کیفی مک کانکی براث

• ظاهر پودر: بژ، یکدست و پودری
• ظاهر محیط آماده: محلول بنفش رنگ و شفاف.
• نتیجه کشت باکتری در شرایط هوازی پس از گرماگذاری در دمای ۲±۳۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۲۴-۱۸ ساعت