محیط کشت مولر هینتون آگار – Mueller Hinton

محیط کشت میکروبی مولر هینتون آگار که به نام محیط کشت Mueller Hinton Agar نیز شناخته می شود، که حاوی عصاره گوشتی (Beef Extract)، اسید هیدرولیزات کازئین (Acid Hydrolysate of Casein)، نشاسته و آگار است. عصاره گوشتی و هیدرولیزات اسید کازئین نیتروژن، ویتامین، کربن، اسیدهای آمینه، گوگرد و سایر مواد مغذی ضروری را فراهم می کند. نشاسته برای جذب متابولیت های سمی اضافه می شود. هیدرولیز نشاسته باعث تولید دکستروز می شود که به عنوان یک منبع انرژی عمل می کند.

محیط کشت مولر هینتون آگار در سال 1941 برای اولین‌بار جهت جداسازی گونه‌های بیماری‌زا نایسریا ابداع و استفاده شد، اما امروزه عنوان یک محیط کشت افتراقی و غیرانتخابی به طور عمده برای آزمایش حساسیت معمول میکروارگانیسم‌های غیر مستعد با تکنیک انتشار دیسک کربی _بائر مورداستفاده قرار می‌گیرد. این محیط بسیار رقیق و شل است بنابراین بهترین گزینه برای انتشار بهتر آنتی‌بیوتیک‌هاست.

کاربرد محیط کشت مولر هینتون آگار

این محیط کشت به‌عنوان یک محیط استاندارد روش Bauer Kirby بیشترین کاربرد را در سنجش حساسیت آنتی‌بیوتیکی دارد؛ علاوه بر این محیط کشت مناسبی برای رشد باکتری نایسریا محسوب می‌شود.

اجزا تشکیل‌دهنده محیط کشت مولر هینتون آگار

• عصاره گوشت گاو و هیدرولیز اسید کازئین: تأمین‌کننده نیتروژن، ویتامین‌ها، کربن، اسیدهای آمینه، گوگرد و سایر مواد مغذی ضروری
• نشاسته: جذب سموم آزاد شده از باکتری‌ها به جهت مانع شدن از تداخل آنتی‌بیوتیک‌ها
• سولفامید، تری متوپریم و تتراسایکلین (غلظت کم): مهارکننده‌های تیمیدین و تیمین  پاراآمینوبنزوئیک اسید (PABA) مقدار حداقلی.

نحوه آماده‌سازی Mueller Hinton Agar

با اضافه‌کردن آب به پودر آگار آن را به مدت 1 دقیقه بر روی حرارت 30 تا 40 درجه قرار داده تا به‌خوبی حل شود، سپس آن را به مدت 15 دقیقه درون اتوکلاو با حرارت 121 درجه سانتیگراد قرار می‌دهند.پس از خارج‌شدن از اتوکلاو آن را به درون پتری‌ها می‌ریزند، این کار باید بر روی سطح هموار و افقی انجام شود تا محلول سطح یکنواختی داشته باشد.

نگهداری Mueller Hinton Agar

• این محیط صرفاً برای آزمایشگاه است و باید درب قوطی کاملاً بسته باشد.
• از تابش شدید آفتاب جلوگیری شود
• در محیط خشک و خنک و رطوبت کمتر از 60 % قرار گیرد و باید آن را در دمای 2 تا 8 درجه نگهداری کرد.