محیط کشت نوترینت آگار – Nutrient Agar

محیط کشت میکروبی (Nutrient Agar (NA که به نام محیط کشت نوترینت آگار نیز شناخته می‌شود، به‌عنوان محیط کشتی برای اهداف کلی برای کشت میکروارگانیسم‌های کم سخت‌پسند مورداستفاده قرار می‌گیرد و می‌تواند با خون و سایر مایعات بیولوژیک غنی شود. این محیط کشت، یک محیط کشت پایه می‌باشد که برای نگه‌داری از میکرو ارگانیسم‌ها، کشت میکروارگانیسم‌های سخت پسند با غنی‌سازی محیط کشت به‌وسیله خون و یا سرم و همچنین برای بررسی خلوص قبل از آزمون‌های بیوشیمیایی و یا سرولوژیکی مورداستفاده قرار می‌گیرد. محیط کشت NA برای اهداف آموزشی که لازم است محیط کشت برای مدت طولانی‌تری در دمای محیط دوام بیاورد بدون به‌وجودآمدن این ریسک که در این محیط غنی رشد بیشتر میکروارگانیسم‌ها صورت گیرد. این محیط کشت با فرمول نسبتاً ساده‌ای که دارد هنوز هم در آزمایشگاه‌ها برای آزمایش‌های میکروبی مواد مختلف استفاده می‌شود و همچنین برای متدهای استاندارد هم استفاده از این محیط کشت پیشنهاد می‌شود. این یکی از محیط‌های کشت غیرانتخابی می‌باشد که برای کشت روتین میکروارگانیسم‌ها استفاده می‌شود.

ترکیبات Nutrient Agar

• پپتون
• سدیم کلرید
• HM پپتون
• عصاره مخمر
• آگار

آماده‌سازی محیط Nutrient Agar

• ۲۰ گرم از پودر محیط را در یک لیتر آب مقطر حل کنید.
• به‌آرامی حرارت داده و به مدت چند ثانیه بجوشانید تا محیط به طور کامل حل شود.
• محیط کشت را در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید. 

فرآیند آزمایش نوترینت آگار

• قبل از تلقیح باید پلیت در دمای آزمایشگاه قرار گیرند تا با محیط اتاق هم دما شوند.
• چنانچه نمونه به‌وسیله سواپ به محیط کشت منتقل می‌شود، بایستی سواپ در گوشه‌ای از پلیت کشیده شود. سپس از این ناحیه کشت چندمرحله‌ای داده تا کلنی‌های تک به دست آید.
• در کنار این محیط کشت بهتر از محیط‌های کشت انتخابی نیز استفاده کرد.
• پلیت‌های به مدت ۴۸-۱۸ ساعت در دمای ۳۷-۳۵ درجه سانتی‌گراد گرماگذاری کنید.

نتیجه و تفسیر نوترینت آگار

پلیت‌ها را پس از گرماگذاری از لحاظ رشد کلنی‌ها بررسی کنید.

نکات تکمیلی Nutrient Agar

• محیط کشت نوترینت آگار حاوی ۱/۵% نمک سدیم کلراید نسبت به این محیط قلیایی‌تر بوده و همچنین افزودن ۰/۸% سدیم کلراید به محیط باعث حفظ تعادل اسموتیک شده و از لیز شدن سلول‌ها جلوگیری می‌کند.
• از محیط کشت نوترینت آگار که در لوله تهیه شده باشد برای کشت و نگهداری کشت‌های خالص استفاده می­شود. باکتری کشت داده شده در لوله می­تواند برای انجام تست­های سرولوژیکی و یا بیوشیمیایی مورداستفاده قرار گیرد.
• پودر محیط داخل قوطی کاملاً دربسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتی‌گراد و محیط آماده در دمای ۸-۲ درجه سانتی‌گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.

کنترل کیفی Nutrient Agar

• ظاهر پودر: پودری، یکدست و کرم رنگ.
• ظاهر محیط آماده: کهربایی روشن، کمی کدر.
• نتیجه کشت باکتری در شرایط هوازی پس از گرماگذاری در دمای ۲±۳۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۲۴-۱۸ ساعت