محیط کشت PCSM آگار – پلیت کانت اسکیم میلک

محیط کشت میکروبی PCSM که به نام محیط کشت Plate Count Skim Milk Agar (پلیت کانت اسکیم میلک آگار) نیز شناخته می‌شود، یک محیط کشت غیرانتخابی می‌باشد که برای شمارش میکروارگانیسم‌های موجود در شیر و محصولات لبنی به کار می‌رود. این محیط کشت به توصیه فدراسیون بین‌المللی لبنی (Internationaler Milchwirtschaftsverband) تولید شده است.

علاوه بر این محیط کشت نهایی دارای مواد مغذی برتری خواهد بود که محیط را به شرایط مطلوب‌تری برای رشد میکروارگانیسم‌ها در شیر مجهز می‌کند. سرعت بهبود بیشتر بوده و تعداد بیشتری از میکروارگانیسم‌ها می‌توانند در این محیط کشت نسبت به سایر محیط‌های کشت (در اهداف مشابه) رشد کنند.

نحوه آماده‌سازی محیط کشت Plate Count Skim Milk Agar 

۲۰ گرم از محیط کشت را در یک لیتر آب مقطر بریزید و تقریباً ۱۵ دقیقه آن را به حال خود بگذارید، سپس با استفاده از حرارت حمام آب گرم آن را حل کنید، سپس خیلی سریع آن را خوب هم بزنید. در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد برای مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید. بعد از آن تا دمای ۵۰ درجه سانتی‌گراد سرد کنید و plate را پر کنید. Plate  شفاف و به شکل  opalescent و زرد روشن هستند.

طرز تهیه کلی محیط‌های کشت 

1. همان‌طوری که می‌دانید محیط‌های کشت به سه دسته جامد، نیمه جامد، مایع تقسیم می‌شوند. محیط‌های مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است. مثلاً حدود (۲/۰%) و محیط‌های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم و بالاخره محیط‌های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .
2. برای ساختن محیط‌های کشت باکتری، از پودر مخصوص که در شیشه‌های مربوطه قرار دارد، استفاده می‌کنیم.
3. در روی این شیشه‌ها ترکیب محیط به طور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است.
4. مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده و در مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته‌اید اضافی نموده و آن را کاملاً‌ حل نمایید.
5. سپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه‌پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید.
6. تا زمان جوشیدن آن را چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و به مدت یک دقیقه بجوشد.
7. پس از آنکه مایع بجوش آمد، آن را برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید .
8. ظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود.
9. بعد از استریل کردن بگذارید تا حدود c45⁰– 40 خنک شود .
10. سپس درحالی‌که ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آن را با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید.
11. محتویات را درون پلیت‌های استریل شده بین ^cc20- 15 از محل محلول بریزید.
12. بعد پلیت‌ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند و از تکان دادن آن خودداری نمایید.
13. پس از جامد شدن محیط‌های کشت نوترینت آگار را جمع کرده و در c37⁰ به مدت ۲۴ ساعت قرار دهید.
14. اگر محیط‌ها آلوده نشده باشند آنها را از c37⁰ بیرون بیاورید.
15. در یخچال ۴ درجه سانتی‌گراد قرار می‌دهید .