محیط کشت PDB – پوتیتو دکستروز براث

محیط کشت میکروبی Potato Dextrose Broth – پتیتو دکستروز براث که به نام PDB نیز شناخته می‌شود، برای کشت قارچ‌ها در آزمایشگاه استفاده می‌شود. این محیط کشت برای اهداف تشخیص بیماری و سایر وضعیت‌های مربوط به انسان کاربردی ندارد. Potato Dextrose Broth محیط کشت براث عمومی می‌باشد که برای مخمرها و moldها به کار می‌رود. PH پایین آن محیط کشت از رشد باکتری‌ها در آن جلوگیری می‌کند. این محیط کشت فرمولی شبیه به Potato Dextrose Agar دارد، با این تفاوت که براث از آن حذف شده است. محیط PDB یک محیط کشت میکروبی معمول بوده که از الحاق سیب‌زمینی و دکستروز ساخته می‌شود و یکی از محیط‌های کشت پرکاربرد برای رشد قارچ‌ها و باکتری‌ها می‌باشد. این محیط کشت می‌تواند به همراه مکمل‌ها و آنتی‌بیوتیک‌ها برای جلوگیری از رشد باکتری‌ها و قارچ‌هایی که در رشد مخمرها و moldها تداخل ایجاد می‌کنند، به کار رود. محیط کشت Potato Dextrose برای جداسازی و شمارش میکروبی مخمرها و moldها در نمونه‌های خشک، آرایشی و کلینیکی به کار می‌رود. مواد مغذی موجود در سیب‌زمینی خاصیت اسپورزایی در moldها و همچنین تولید رنگ‌دانه را در برخی درماتوفیت ها تحریک می‌کند، درحالی‌که دکستروز رشد کلی میکروارگانیسم‌ها را ساپورت می‌کند. براث هم برای جامدسازی به کار می‌رود.

آماده سازی محیط PDB

• ۲۴ گرم از پودر محیط را در یک لیتر آب مقطر حل کنید. به آرامی حرارت دهید تا محیط کاملا حل شود.
• محیط کشت را در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید.

فرآیند آزمایش

• نمونه مورد نظر را مطابق با پروتکل مربوطه کشت دهید.
• لوله های تلقیح شده را به مدت ۴۸ ساعت در شرایط هوازی و در دمای ۲۸ درجه سانتی گراد گرماگذاری کنید.

نتیجه و تفسیر

پس از دوره گرماگذاری، واکنش نمونه‌های مجهول را با سوش‌های استاندارد مقایسه کنید. در این محیط کشت، مخمرها کلنی‌های کرم رنگ مایل به سفید ایجاد می‌کنند. کپک‌ها، کلنی‌های رشته در رنگ‌های متفاوت تولید می‌کنند. تعداد کلنی‌ها را شمارش کرده و با احتساب ضریب رقت نمونه (در صورت رقیق کردن نمونه) تعداد باکتری موجود در یک گرم یا یک میلی‌لیتر از نمونه را تخمین بزنید.

چرا عصاره سیب‌زمینی؟!

عصاره سیب‌زمینی موجود در این محیط کشت سرشار از نشاسته و دیگر مواد مغذی موردنیاز برای افزایش هاگ و تولید رنگ‌دانه در برخی درماتوفیت ها می‌باشد.

کنترل کیفی محیط کشت PDB

• ظاهر پودر: پودری و یکنواخت، به رنگ بژ روشن
• ظاهر محیط آماده: نسبتا کدر به رنگ زرد کمرنگ
• نتیجه­ کشت باکتری در شرایط هوازی پس از گرماگذاری در دمای ۲۸ درجه سانتی گراد به مدت ۴۸-۴۰ ساعت

نکات تکمیلی 

• پس از گرماگذاری، پلیت‌ها را از نظر مورفولوژی کلنی‌ها بررسی کنید. دقت داشته باشید که محیط کشت Potato Dextrose Agar یک محیط افتراقی نیست، بنابراین برای شناسایی دقیق‌تر جنس و سویه میکروارگانیسم‌ها باید از بررسی‌های میکروسکوپی و آزمایش‌های بیوشیمیایی استفاده کرد.
• پودر محیط داخل قوطی کاملاً دربسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتی‌گراد و محیط آماده در دمای ۸-۲ درجه سانتی‌گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.