محیط کشت پی اس بی براث – PSB Base

محیط کشت میکروبی PSB Broth Base که به نام محیط کشت پی اس بی براث بیس نیز شناخته می شود ، برای شناسایی بیماری‌های احتمالی انسان که از Yersinia enterocolitica موجود در آب و غذای مصرفی انسان و حیوان ناشی می‌شود پیشنهاد شد. تست مورداستفاده “Presence-Absence Test” می‌باشد.

PSB Broth برای غنی‌سازی رقت ۱:۱۰ نمونه‌ها در ۲۲ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد برای مدت ۵ روز استفاده می‌شود.

آماده‌سازی محیط کشت میکروبی PSB Broth Base

۳۱ گرم از محیط کشت را در ۱۰۰۰ میلی‌لیتر آب مقطر سرد بریزید و در تیوب‌های فلاسک توزیع کنید و در اتوکلاو تحت دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد و به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید.PH نهایی ۷٫۶ می‌باشد.

نگه‌داری محیط کشت PSB Broth Base

محیط کشت دهیدراته را در ۱۰ تا ۳۰ درجه سانتی‌گراد نگه دارید.

کنترل کیفی محیط کشت پی اس بی براث بیس

• رشد Y.enterocolitica ATCC 23715
• ممانعت از رشد E.coli ATCC 25922

طرز تهیه کلی محیط‌های کشت 

1. همان‌طوری که می‌دانید محیط‌های کشت به سه دسته جامد، نیمه جامد، مایع تقسیم می‌شوند. محیط‌های مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است. مثلاً حدود (۲/۰%) و محیط‌های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم و بالاخره محیط‌های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .
2. برای ساختن محیط‌های کشت باکتری، از پودر مخصوص که در شیشه‌های مربوطه قرار دارد، استفاده می‌کنیم.
3. در روی این شیشه‌ها ترکیب محیط به طور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است.
4. مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده و در مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته‌اید اضافی نموده و آن را کاملاً‌ حل نمایید.
5. سپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه‌پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید.
6. تا زمان جوشیدن آن را چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و به مدت یک دقیقه بجوشد.
7. پس از آنکه مایع بجوش آمد، آن را برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید .
8. ظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود.
9. بعد از استریل کردن بگذارید تا حدود c45⁰– 40 خنک شود .
10. سپس درحالی‌که ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آن را با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید.
11. محتویات را درون پلیت‌های استریل شده بین ^cc20- 15 از محل محلول بریزید.
12. بعد پلیت‌ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند و از تکان دادن آن خودداری نماید.
13. پس از جامد شدن محیط‌های کشت نوترینت آگار را جمع کرده و در c37⁰ به مدت ۲۴ ساعت قرار دهید.
14. اگر محیط‌ها آلوده نشده باشند آنها را از c37⁰ بیرون بیاورید.
15. در یخچال ۴ درجه سانتی‌گراد قرار می‌دهید.