استخراج RNA یکی از فرایندهای پرکاربرد در بیولوژی مولکولی است. استخراج RNA در آزمایش‌های تحقیقاتی اولین گام برای سنجش بیان یک ژن یا میکرو RNA در نمونه موردمطالعه و یا کلون سازی یک ژن در موجودات یوکاریوتی است و انجام دقیق و درست این مرحله تأثیر زیادی در ادامه مراحل تحقیقاتی دارد. اگر فرایند استخراج RNA شما به‌درستی انجام نشود شما در مراحل ساخت cDNA و انجام PCR خود به مشکلات زیادی برخورد خواهید کرد و ممکن است روزها و شاید ماه‌ها وقت شما بابت یک RNA بی‌کیفیت از بین برود.

نکته دیگر در استخراج RNA این است که بعضی از نمونه‌ها حیاتی بوده و شما به میزان محدودی از نمونه بافت یا سلول دسترسی دارید و خراب‌شدن این نمونه زیان جبران‌ناپذیری به فرایند تحقیق و یا تشخیص شما وارد خواهد کرد.

فرایند استخراج RNA روش‌های مختلفی دارد و بعضی از این روش‌ها در شرایط معمول نتیجه قابل قبولی دارند اما به جهت حساسیت این مرحله در ادامه فرایندهای آزمایشگاهی شما توصیه می‌شود این مرحله توسط کیت استخراج RNA انجام شود.

معرفی کیت استخراج RNA

کیت استخراج RNA شرکت آناسل می‌تواند با سرعت بسیار بالا، نمونه RNA باکیفیت بسیار بالا را از نمونه سلول، بافت و مخمر با استفاده از سیستم تخلیص ستونی با ظرفیت نزدیک به 100 میکروگرم RNA جداسازی کند. از مزایای این کیت بافر لیز کننده بسیار قوی این کیت است که علاوه بر لیز سلولی امکان پایدارسازی RNA را نیز داشته و شما می‌توانید از بافر لیز کننده به‌عنوان بافر نگهدارنده (RNA Later) استفاده کنید. این کیت برای استخراج RNA توتال استفاده می‌شود. در صورت نیاز به استخراج RNA ویروسی می‌توانید از کیت استخراج RNA ویروسی استفاده کنید.

مزایا کیت استخراج RNA

• قدرت بسیار بالا استخراج RNA
• کیفیت بالاتر نسبت به کیت‌های آلمانی و کره‌ای
• قیمت بسیار مناسب
• سادگی روند استخراج با استفاده از ستون‌های فیلتردار سیلیکونی
• خدمات پس از فروش و پشتیبانی کامل محصول
• نیمه‌عمر بالای کیت
• پروتکل فارسی بدون نکات اضافه
• استفاده از بافر لیز کننده این کیت به‌عنوان نگهدارنده RNA نمونه بافت و سلول

محتویات کیت استخراج RNA

1. Spin column
2. Lysis buffer
3. Precipitation
4. Wash buffer 1
5. Wash buffer 2
6. Elution buffer E

فرایند استخراج RNA

نمونه‌ها ابتدا توسط بافر لیز کننده، لیز شده و سپس جهت آماده‌شدن RNA برای اتصال به ستون به محلول لیز شده اتانول اضافه می‌شود. سپس ترکیب حاصل شده به ستون سیلیکا منتقل شده و با چرخش ستون در سانتریفیوژ ترکیبات اضافه از ستون خارج شده و تنها RNA به ستون متصل باقی خواهد ماند. سایر ترکیبات باقی‌مانده در سطح ستون توسط بافر شستشو حذف شده و در نهایت RNA خالص توسط بافر شستشو دهنده از ستون آزاد می‌شود.

کاربردها

کیت استخراج RNA آناسل می‌تواند به شما جذب نوری A260/280 در حدود 1.9 تا 2.1 را ارائه کند که این RNA قابلیت استفاده برای موارد زیر را دارا می‌باشد:

• Northern, dot, and slot blotting
• End-point RT-PCR
• Quantitative, real-time RT-PCR
• Array analysis
• Poly A+ RNA selection

بازده کیت استخراج RNA

بازده کیت به میزان زیادی به نمونه مورداستفاده شما، میزان نمونه، شرایط نگهداری شما داشته اما به‌صورت میانگین در شرایط معمول از کشت سلول‌های انسانی در حدود 10 تا 30 میکروگرم RNA استخراج خواهد شد.