پری میکس تک ۲x (مستر میکس)
توضیحات:
Taq 2X premix پارس توس دارای DNA تک پلیمراز، بافر واکنش ، مخلوط dNTPs (نوکلئوتید ها)، تثبیت کننده پروتئین، و راحتی استفاده را با افزودن رسوب برای الکتروفورز و محلول بارگذاری رنگ ۲x بهینه می کند. به طور کلی ، پریمیکس تک ۲x هیچ کاهش فعالیتی را در مقایسه با تک پلیمراز ، حتی در دمای اتاق نشان نمی دهد. پریمیکس تک ۲x برای محصولات PCR زیر ۳ Kb (کیلو باز) مناسب است.
ذخیره سازی کیت:
این کیت باید در دمای ۲۰- درجه سانتیگراد نگهداری شود و از یخ زدگی و ذوب مجدد غیرضروری باید خودداری شود. در این شرایط معرف ها از تاریخ تولید به مدت یک سال پایدار هستند.
پروتکل عمومی واکنش:
- پریمیکس تک ۲x را ذوب کنید.
- مستر میکس را مانند جدول زیر تهیه کنید.
ترکیبات | حجم | غلظت نهایی |
پریمیکس تک ۲x | ۱۰ µL | ۱x |
پرایمر بالادست | ۱ µL | ۰٫۵ pmoles/ µL |
پرایمر پایین دست | ۱ µL | ۰٫۵ pmoles/ µL |
DNA الگو | متغیر | ۱۰ fg ~1 µg |
آب مقطر استریل | متغیر | – |
حجم نهایی | ۲۰ µL | – |
- ۳٫ مستر میکس را مخلوط کرده و حجم مناسب را در لوله های PCR پخش کنید و به مدت ۱۰ ثانیه در میکروسانتریفیوژ، سانتریفیوژ کنید.
۴- PCR را با استفاده از پارامترهای استاندارد خود (چرخه ۳ مرحله ای) اجرا کنید.
چرخه | زمان | دما (سانتیگراد) |
۱ | ۵ دقیقه | ۹۴ |
۳۰~۲۵ | ۳۰ ثانیه | ۹۴ |
۳۰ ثانیه | ۶۰~۵۰ | |
۶۰~۳۰ ثانیه | ۷۲ | |
۱ | ۵ دقیقه | ۷۲ |
۵- محصولات PCR را با ژل آگارز الکتروفورز جدا کرده و با اتیدیوم برماید یا هر روش دیگری نمایش دهید.
* برای محصولات PCR بزرگتر از ۳ ~ ۴ کیلو باز، از زمان اضافی تقریبی ۱ دقیقه برای هر کیلو باز DNA استفاده کنید.
* یک قطعه DNA که توسط تک پلیمراز تکثیر می شود دارای یک پیش آمدگی است و شما را قادر می سازد آن را با استفاده از وکتور T کلون کنید.
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.