محیط کشت تریپتون واتر – Tryptone Water

محیط کشت میکروبی Tryptone Water که به نام محیط کشت تریپتون واتر (آب تریپتونه) نیز شناخته می‌شود، به دلیل محتوای بالای تریپتوفان، بستر خوبی برای تولید ایندول است و برای این منظور قابل‌اعتمادتر از آب پپتون است. توانایی موجودات خاص برای تجزیه تریپتوفان آمینواسید با تشکیل اندوول یک ویژگی مهم است که برای طبقه‌بندی و شناسایی باکتری‌ها استفاده می‌شود

محیط مایع برای تشخیص میکرو ارگانیسم‌های تشکیل‌دهنده اندول به علت محتوای بالای تریپتوفان آن، عمدتاً برای کشت و نگهداری از میکروارگانیسم‌های هوازی و فیزیولوژیکی گیاهی مانند گونه‌های Escherichia coli و Pseudomonas استفاده می‌شود.

نگهداری محیط کشت Tryptone Water

این محیط صرفاً برای آزمایشگاه استو باید درب قوطی کاملاً بسته باشد. از تابش شدید آفتاب جلوگیری شود، در محیط خشک و خنک با دمای بین 15°C+  تا 25°C و رطوبت کمتر از 60% قرار گیرد.

طرز تهیه کلی محیط‌های کشت

1. همان‌طوری که می‌دانید محیط‌های کشت به سه دسته جامد، نیمه جامد، مایع تقسیم می‌شوند. محیط‌های مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است. مثلاً حدود (۲/۰%) و محیط‌های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم و بالاخره محیط‌های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .
2. برای ساختن محیط‌های کشت باکتری، از پودر مخصوص که در شیشه‌های مربوطه قرار دارد، استفاده می‌کنیم.
3. در روی این شیشه‌ها ترکیب محیط به طور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است.
4. مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده و در مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته‌اید اضافی نموده و آن را کاملاً‌ حل نماید.
5. سپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه‌پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید.
6. تا زمان جوشیدن آن را چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و به مدت یک دقیقه بجوشد.
7. پس از آنکه مایع بجوش آمد، آن را برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید .
8. ظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود.
9. بعد از استریل کردن بگذارید تا حدود c45⁰– 40 خنک شود .
10. سپس درحالی‌که ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آن را با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید.
11. محتویات را درون پلیت‌های استریل شده بین ^cc20- 15 از محل محلول بریزید.
12. بعد پلیت‌ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند و از تکان دادن آن خودداری نمایید.
13. پس از جامد شدن محیط‌های کشت نوترینت آگار را جمع کرده و در c37⁰ به مدت ۲۴ ساعت قرار دهید.
14. اگر محیط‌ها آلوده نشده باشند آنها را از c37⁰ بیرون بیاورید.
15. در یخچال ۴ درجه سانتی‌گراد قرار می‌دهید.