توضیحات

محیط کشت میکروبی Brucella Broth به نام محیط بروسلا براث نیز شناخته می‌شود، محیطی غنی از مواد مغذی و فاکتورهای رشد است که آن را مناسب برای رشد و جداسازی طیف گسترده‌ای از میکروارگانیسم‌ها کرده است. این محیط به طور گسترده‌ای برای کشت گونه‌های بروسلا و بسیاری از بی‌هوازی‌ها، از نمونه‌های تشخیصی استفاده می‌شود.

محیط بروسلا براث بر اساس فرمول APHA  Broth . Brucella Broth) Albimi ) یک محیط عمومی برای کشت گونه‌های Brucella است و میکروارگانیسم‌های فستیدیوس از جمله استرپتوکوک پنومونیه، استرپتوکوک ویریدانس، و نیسریا مننژیدیس. محیط بروسلا براث از رشد میکروارگانیسم‌های فستیدیوس، با وجود پپتون، دکستروز و عصاره مخمر پشتیبانی می‌کند. پپتون‌ها نیتروژن، ویتامین‌ها، مواد معدنی و اسیدآمینه محیط را فراهم می‌کنند. عصاره مخمر یک منبع ویتامین B است و دکستروز منبع انرژی به‌عنوان یک کربوهیدرات قابل تخمیر است.

فرمولاسیون محیط کشت Brucella Broth

طرز تهیه کلی محیط‌های کشت

1. همان‌طوری که می‌دانید محیط‌های کشت به سه دسته جامد، نیمه جامد، مایع تقسیم می‌شوند. محیط‌های مایع معمولاً فاقد آگار هستند یا مقدار آگارشان بسیار کم است. مثلاً حدود (۲/۰%) و محیط‌های نیمه جامد دارای مقدار کمی آگار حدود ۳- ۲ گرم و بالاخره محیط‌های جامد که دارای ۱۵- ۱۳ گرم آگار در لیتر محیط هستند .
2. برای ساختن محیط‌های کشت باکتری، از پودر مخصوص که در شیشه‌های مربوطه قرار دارد، استفاده می‌کنیم.
3. در روی این شیشه‌ها ترکیب محیط به طور کامل و همچنین طرز ساختن آن نوشته شده است.
4. مثلاً برای ساختن نوترینت آگار ابتدا مقدار لازم از پودر آن را وزن کرده و در مقدار معینی آب مقطر که قبلاً در یک ارلن مایر یا بطری ریخته‌اید اضافی نموده و آن را کاملاً‌ حل نمایید.
5. سپس با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را روی سه‌پایه چراغ گازی حرارت می‌دهید.
6. تا زمان جوشیدن آن را چند بار تکان دهید تا خوب حل شود و به مدت یک دقیقه بجوشد.
7. پس از آنکه مایع بجوش آمد، آن را برداشته وبا تکه کاغذ آلومینیومی روی پنبه را می‌پوشانید .
8. ظرف را در اتوکلاو می‌گذارید تا در فشار ۱۵ پاند بر اینچ مربع و حرارت ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل شود.
9. بعد از استریل کردن بگذارید تا حدود c45⁰– 40 خنک شود.
10. سپس درحالی‌که ارلن را در دست راست گرفته و پنبه آن را با دست چپ کنار شعله خارج کرده‌اید، دهانه ارلن را یکبار از درون شعله گاز عبور دهید.
11. محتویات را درون پلیت‌های استریل شده بین ^cc20- 15 از محل محلول بریزید.
12. بعد پلیت‌ها را در کناری بگذارید تا سرد شوند و از تکان دادن آن خودداری نمایید.
13. پس از جامد شدن محیط‌های کشت نوترینت آگار را جمع کرده و در c37⁰ به مدت ۲۴ ساعت قرار دهید.
14. اگر محیط‌ها آلوده نشده باشند آنها را از c37⁰ بیرون بیاورید.
15. در یخچال ۴ درجه سانتی‌گراد قرار می‌دهید.