توضیحات

مهارکننده ریبونوکلئاز یک پروتئین اسیدی، محلول و موجود در سیتوپلاسم است که به مقدار زیادی در جفت انسان وجود دارد. این ماده به روش شیمیایی کروماتوگرافی تعویض یون و با کمک میل ترکیبی از جفت انسان در مقیاس مشخص، استخراج و خالص می‌گردید.وزن مولکولی این پروتئین در حدود 48000 دالتون است که از طریق الکتروفورز با ژل اکریل‌آمید و سدیم دود سیل سولفات  به همراه سایر پروتئین‌های استاندارد سنجش و مشخص گردیده است.

اجزای تشکیل‌دهنده

100mM Tris-HCL (PH 7.5), 1.2mM EDTA, 0.1mg/ml BSA, 100ng/ml RNase , 0.1mg/ml E.coli] 3H[-RNA,50mg/ml yeast RNA and 8mM DTT.

کاربرد مهارکننده ریبونوکلئاز:

از این مهارکننده می‌توان در روش‌هایی که آلودگی RNase مشکل ایجادمی کند، استفاده کرد.این آلودگی ممکن است در موارد زیر ایجاد شود:

1. رونویسی ژنوم در محیط آزمایشگاه
2. بیان ژنوم در محیط آزمایشگاه
3. ساخت و سنتز cDNA
4. فرایند جداسازی و تلخیص اجزای سلولی پستانداران (حاوی کمپلکس mRNA- پروتئین)
5. جداسازی و شناسایی فعالیت‌های ریبونوکلئاز خاص.

کنترل کیفیت

از نظر عملکردی در سنتز RNA و CDNA  عدم وجود اندودوکسی ریبونوکلئازها، اگزودوکسی ریبونوکلئازها، فسفاتاز و ریبونوکلئازها توسط تست‌های باکیفیت مناسب تأیید شده است.

نکات مهم در زمان استفاده از محصول:

• یک واحد از این آنزیم به‌عنوان مقدار مهارکننده ریبونوکلئاز RNaseOFF تعریف می‌شود که برای جلوگیری از فعالیت ۵ نانوگرم RNase A به میزان ۵۰٪ موردنیاز است.
• هنگام انجام واکنش، RNaseOFF را همیشه روی یخ نگه دارید.
• توصیه می‌شود همه کارهای مربوط به RNA یا مراحل کاری حساس به RNase را در شرایطی که آلودگی RNase از بین رفته است، تنظیم کنید.
• سرسمپلر و لوله‌های آزمایش باید با ۰٫۱٪ DEPC نگهداری شوند.
• استفاده از دستکش هنگام کار با RNA بسیار توصیه می‌شود.