مهارکننده ریبونوکلئاز سیناکلون Ribonuclease Inhibitor

Ribonuclease Inhibitor

بازدارنده ریبونوکلئاز، فعالیت RNase A,B,C را با اتصال آنها در حالت غیررقابتی مهار می‌کند. اما توانایی مهار RNase 1، T1، T2، H، U1، U2، CL3 را ندارد.

مهارکننده ریبونوکلئاز یک پروتئین اسیدی، محلول و موجود در سیتوپلاسم است که به مقدار زیادی در جفت انسان وجود دارد. این ماده به روش شیمیایی کروماتوگرافی تعویض یون و با کمک میل ترکیبی از جفت انسان در مقیاس مشخص، استخراج و خالص می‌گردید.وزن مولکولی این پروتئین در حدود 48000 دالتون است که از طریق الکتروفورز با ژل اکریل‌آمید و سدیم دود سیل سولفات  به همراه سایر پروتئین‌های استاندارد سنجش و مشخص گردیده است.

اجزای تشکیل‌دهنده

100mM Tris-HCL (PH 7.5), 1.2mM EDTA, 0.1mg/ml BSA, 100ng/ml RNase , 0.1mg/ml E.coli] 3H[-RNA,50mg/ml yeast RNA and 8mM DTT.

 

کاربرد مهارکننده ریبونوکلئاز:

از این مهارکننده می‌توان در روش‌هایی که آلودگی RNase مشکل ایجادمی کند، استفاده کرد.این آلودگی ممکن است در موارد زیر ایجاد شود:

  1. رونویسی ژنوم در محیط آزمایشگاه
  2. بیان ژنوم در محیط آزمایشگاه
  3. ساخت و سنتز cDNA
  4. فرایند جداسازی و تلخیص اجزای سلولی پستانداران (حاوی کمپلکس mRNA- پروتئین)
  5. جداسازی و شناسایی فعالیت‌های ریبونوکلئاز خاص.

کنترل کیفیت

از نظر عملکردی در سنتز RNA و CDNA  عدم وجود اندودوکسی ریبونوکلئازها، اگزودوکسی ریبونوکلئازها، فسفاتاز و ریبونوکلئازها توسط تست‌های باکیفیت مناسب تأیید شده است.

نکات مهم در زمان استفاده از محصول:

  • یک واحد از این آنزیم به‌عنوان مقدار مهارکننده ریبونوکلئاز RNaseOFF تعریف می‌شود که برای جلوگیری از فعالیت ۵ نانوگرم RNase A به میزان ۵۰٪ موردنیاز است.
  • هنگام انجام واکنش، RNaseOFF را همیشه روی یخ نگه دارید.
  • توصیه می‌شود همه کارهای مربوط به RNA یا مراحل کاری حساس به RNase را در شرایطی که آلودگی RNase از بین رفته است، تنظیم کنید.
  • سرسمپلر و لوله‌های آزمایش باید با ۰٫۱٪ DEPC نگهداری شوند.
  • استفاده از دستکش هنگام کار با RNA بسیار توصیه می‌شود.

دیدگاهها

هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.

.فقط مشتریانی که این محصول را خریداری کرده اند و وارد سیستم شده اند میتوانند برای این محصول دیدگاه ارسال کنند.