توضیحات

محتویات کیتHCV:

• مستر میکس Real time :

پرایمر، پروب ، 50 میلی مولار Mgcl2 ، Taq پلی مراز، 10 میلی مولار dNTP ، بافر با آب

• کنترل مثبت ( 500,000 کپی/میلی لیتر)- کنترل منفی

مخلوط آماده سازی :

• 10 میکرولیتر مستر میکس Real time را به هر میکروتیوب اضافه کنید.
• 5 میکرولیتر RNA ویروسی ، کنترل مثبت و کنترل منفی به هر میکروتیوب بیافزایید، به مدت 10 ثانیه مخلوط و اسپین نمایید، برای ارزیابی کپی نامبر ویروس در نمونه خود ، 2 تا serial dilutions ساخته و آن را برای فرآیند Real- time PCR خود تعریف کنید.

برنامه RT-PCR:

سنتز CDNA : پنجاه درجه به مدت 30 دقیقه

دناتوراسیون آغازی : 95 درجه سانتی گراد به مدت 5 دقیقه: در این مرحله Taq پلی مراز فعال شده و DNA ویروسی دناتوره می شود.

45 سیکل : 95 درجه سانتی گراد به مدت 15 ثانیه ،55  درجه سانتی گراد به مدت10  ثانیه، 72 درجه به مدت 30 ثانیه

آشکار سازی فلورسنت: در green (FAM) channel و در55 درجه سانتی گراد.

آنالیز Real-time  :

اگر بعد از 40  سیکل نمونه مثبت بود، آزمایش باید دوباره انجام شود.

مشاهده سایر محصولات مرتبط