کیت Real-time PCR Assay برای تشخیص ویروس پاپیلومای انسانی
HUMAN PAPILLOMA VIRUS – ASSAY
محتویات کیت:
- مستر میکس Real time :
پرایمر، پروب ، 50 میلی مولار Mgcl2 ، Taq پلی مراز، 10 میلی مولار dNTP ، بافر با آب
- کنترل مثبت ( 500,000 کپی/میلی لیتر)- کنترل منفی
مخلوط آماده سازی :
- 10 میکرولیتر مستر میکس Real time را به هر میکروتیوب اضافه کنید.
- 5 میکرولیتر DNA ویروسی ، کنترل مثبت و کنترل منفی به هر میکروتیوب بیافزایید، به مدت 10 ثانیه مخلوط و اسپین نمایید، برای ارزیابی کپی نامبر ویروس در نمونه خود ، 2 تا serial dilutions ساخته و آن را برای فرآیند Real- time PCR خود تعریف کنید.
برنامه Real-time PCR :
- دناتوراسیون آغازی : 95 درجه سانتی گراد به مدت 5 دقیقه: در این مرحله Taq پلی مراز فعال شده و DNA ویروسی دناتوره می شود.
- 40 سیکل : 95 درجه سانتی گراد به مدت 15 ثانیه ، 58 درجه سانتی گراد به مدت 10 ثانیه، 72 درجه سانتی گراد به مدت 15 ثانیه
- آشکار سازی فلورسنت: در green (FAM) channel و در 72 درجه سانتی گراد.
آنالیز Real-time :
اگر بعد 38 سیکل نمونه مثبت بود، آزمایش باید دوباره انجام شود و با الکتروفورز 1.5 تا 2 % آگارز چک شود.
باندهایی که از 120 جفت باز بزرگتر باشند، HPV مثبت می باشند.
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.