کیت لومینسانس پارس توس

کیت لومینسانس پارس توس بر پایه سیستم دو جزئی و از دو محلول A و محلول B تشکیل شده است. Chemiluminescence SubstrateL پارس توس برای روشهای وسترن بلات بر پایه HRP توصیه می شود.

استفاده از معرف افزاینده تشخیص واکنش های شیمی نوری در پژوهش های وسترن بلات بر پایه آنزیم HRP توصیه میشود.

کیت لومینسانس پارس توس دارای دو محلول A و B میباشد و از طرز کاز 2 مرحله ایی بهره میبرد.

این معرف در حضور پرکسیداز، شروع به ساطع کردن نور از واکنش شیمایی نوری (chemiluminescence) میکند.

این نور را میتوان بوسیله فیلم اتو رادیوگراف، دوربین های CCD و یا دستگاه خوانش واکنش شیمیایی نوری (chemiluminescence reading device)، به صورت کمی اندازه گیری کرد.

این کیت تشخیص واضحی از عملکرد PVDF و انتقالات غشای نیتروسلولوز طی فرایند ایمونو بلاتینگ، ارائه میدهد.

شرایط نگه داری کیت لومینسانس پارس توس :

کیت را در دمای 4-8 درجه سانتی گراد نگه داری کنید. دمای بهینه برای نقل و انتقال آن، دمای محیط (20 درجه سانتی گراد) میباشد.

این کیت لومینسانس پارس توس حساس به نور بوده و باید از نور خورشید و یا هر منبع UV دیگر دور بماند.

لازم به ذکر است که شرکت پارس توس، این محصول را به مدت 24 ماه از تاریخ تولید گارانتی مینماید.

پروتکل کیت لومینسانس پارس توس:

محلول های A و B را با مخلوط کردن به نست مساوی 1:1 معرف مورد نیاز برای واکنش شیمایی نوری را آماده کنید.
1 میلی لیتر از معرف را برای هر سانتی متر مربع از غشا استفاده نمایید یا هر مقداری که مطمئن شوید تمام بلات با معرف پوشیده شده است.نکته : معرف را قبل از شروع آزمایش آماده کنید.
بلات را همراه با معرف به مدت 2 دقیقه انکوبه نمایید.
بلات را از معرف جدا نموده و آن را در یک محافظ غشایی پلاستیکی قرار دهید. احتمالا پلاستیکی از جنس ورق محافظ یا روکش پلاستیکی استفاده میشود.
از یک دستمال جاذب برای حذف مایع اضافی و خارج کردن هر گونه حباب از بین بلات و سطح محافظ غشایی استفاده نمایید. نکته : فیلم را هنگام پرتودهی کاملا خشک نگه دارید.
تمام لامپ ها و منابع نوری، به غیر از آنهایی که اشکالی در فیلم ایجاد نمیکند را خاموش نمایید. ( برای مثال نور ایمن قرمز روشن بماند)
با دقت کافی قطعه ایی از فیلم را بر روی غشای رپ (Wrapped) قرار دهید. زمان پیشنهادی پرتو دهی 60 ثانیه میباشد. مدت زمان پرتو دهی بنابر دستیابی به نتایج بهینه احتمالا متفاوت خواهد بود.

فیلم تقویت شده یا از پیش فلش شده ضروری نیست. (Enhanced or pre-flashed film)

ما معمولا از فیلم HyperfilmTM –ECL استفاده می نماییم (Amersham Life Science Inc) و فیلم را به مدت 10 ثانیه، 1 دقیقه، 5 دقیقه و 20 دقیقه در معرض بلات، برای نشان دادن سیگنال موجود در واکنش شیمیایی نوری آنتی بادی-آنتی ژن قرار می دهیم.

اگر سیگنال ( نوری ) بسیار زیاد باشد، زمان پرتو دهی را کاهش داده یا با کاهش غلظت آنتی ژن – آنتی بادی سیستم را بهینه میکنیم. اگر از دوربین CCD استفاده مینمایید، زمان بیشتری برای پرتو دهی احتاج است. بر حسب نیاز، بلات ممکن است نوار بندی یا برسی مجدد گردد.