کیت وسترن بلات سیتو متین ژن

western blot kit CMG

شناسه محصول: نامعلوم

کیت وسترن بلات حاوی مواد لازم برای تهیه ژل پلی اکریل آمید و رنگ آمیزی کماسی و بافر ترانسفر برای تهیه ژل SDS-PAGE و انتقال پروتئین ها به غشا جهت انجام وسترن بلاتینگ (Western blotting) و بررسی سایز و خواص پروتئین…

برند: 1272

حجم: 20 mini-gels

وسترن بلات یک روش آزمایشگاهی برای تشخیص مولکول‌های خاص پروتئین از میان مخلوطی از پروتئین‌ها که به طور گسترده در زیست‌شناسی مولکولی و ایمنی‌زایی مورداستفاده قرار می‌گیرد. این مخلوط می‌تواند شامل تمام پروتئین‌های مرتبط با یک بافت یا سلول خاص باشد. بعضاً به این تکنیک ایمونوبلات هم گفته می‌شود. از روش‌های به‌کاررفته در این تکنیک می‌توان به SDS-PAGE و الکتروفورز اشاره کرد. ابتدا پروتئین توسط لایة SDS استخراج انجام شده بعد توسط تکنیک الکتروفورز به کمک نیروی الکتریکی جدا شده و بعد از رنگ‌آمیزی قابل‌مشاهده است.

مکانیسم

تکنیک بلات شامل ۳ مرحله می‌باشد :

جداسازی پروتئین‌ها بر اساس اندازه
انتقال به غشا جامد
نشان‌دار کردن پروتئین هدف با آنتی‌بادی اولیه و ثانویه مناسب جهت تشخیص

در ابتدا مولکول‌های پروتئین با استفاده از تکنیک SDS-PAGE جدا می‌شوند و سپس جهت تشخیص نهایی و دقیق پروتئین موردنظر از تکنیک وسترن‌بلات استفاده می‌شود. در این تکنیک ژل SDS-PAGE را با یک غشا از جنس نیتروسلولز و یا PVDF جفت نموده و جهت جریان دستگاه وسترن‌بلات را جوری تنظیم نموده که پروتئین‌ها از ژل SDS PAGE به سمت غشا حرکت نمایند. در اغلب موارد انتقال پروتئین از غشا به ژل با کمک نیروی الکتریکی صورت می‌گیرد که این نوع انتقال به انتقال الکتروفورزی معروف است. انتقال الکتروفورزی به دو صورت انجام شده:

انتقال تر: انتقال در تانک
انتقال روش نیمه‌خشک

البته میتوان به طریق انتشار با خاصیت مویینگی یا پمپ خلا نیز پروتئین‌ها را انتقال داد. پس از انتقال پروتئین‌ها به غشا, با استفاده از آنتی‌بادی مخصوص پروتئین هدف، آن را رنگ‌آمیزی کرده تا قابل تشخیص باشد.