کشت سلول و بافت

به فرایندی که سلول‌های یوکاریوتی در فلاسک و یا پلیت کشت سلول توسط محیط کشت مناسب رشد داده شوند، کشت سلولی (بافت) گفته می‌شود. این اصطلاح بیشتر در مورد کشت سلول‌های جانوران پرسلولی کاربرد دارد. برای کشت سلول‌های جانوری از محیط کشت‌های خاصی استفاده می‌شود (مثلاً DMEM). معمولاً سلول‌های جانوری را در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد و در تجهیزاتی نظیر انکوباتورهای CO2 دار کشت می‌دهند.

بافر و مکمل محیط کشت

محیط رشد مورداستفاده برای کشت سلول نیازمند این هستند تا مواد مغذی، بافر، مکمل و سایر معرف‌های خاص به آن اضافه شود تا نتایج حداکثر کشت و سازگاری رشد حاصل گردد. آمینو اسیدها، ویتامین‌ها و هپس از جمله مکمل‌هایی هستند که به محیط کشت اضافه می‌شوند. ال – گلوتامین و ال – آلانیل در کشت سلول‌های عصبی و بسیاری از سلول‌های دیگر برای بقا بیشتر سلول‌ها مورد مصرف قرار می‌گیرد. ترکیبات مکمل خاص نیز از قبیل MEM آمینواسید و MEM ویتامین، برای انواع خاصی از سلول‌ها در دسترس می‌باشد.

رنگ‌آمیزی محیط کشت سلولی

برای مطالعه‌ی اجزای درون‌سلولی و ساختاری آن، از روش‌های مختلف رنگ‌آمیزی استفاده می‌شود. رنگ‌های مختلف به علت داشتن بار یونی متفاوت برای رنگ‌آمیزی قسمت‌های مختلف سلول و بافت مورداستفاده قرار می‌گیرند.

انواع رنگ‌ها

1- رنگ اسیدی (رنگ آنیونی) برای رنگ گیری اجزای دارای بار مثبت، مانند پس‌زمینه، پروتئین‌های هیستون و … استفاده می‌شود.

مثالی از رنگ‌های اسیدی: Eosin، Nigrosin، مرکب هند

2- رنگ اساسی (رنگ کاتیونی) برای رنگ گیری اجزای دارای بار منفی، مانند سلول باکتری استفاده می‌شود.

مثالی از رنگ‌های اساسی: متیلن بلو، سافرانین، مالاشیت گرین، فوشین پایه، کریستال ویوله

3- رنگ خنثی در واقع نمکی از رنگ اسیدی و قلیایی است.

مثالی از رنگ‌های خنثی: رنگ giemsa

تجهیزات آزمایشگاه کشت سلول و بافت

• انکوباتور CO2 : این وسیله با کنترل رطوبت، دما، میزان اکسیژن و دی‌اکسیدکربن شرایطی مناسب برای رشد ارگانیسم‌های زنده فراهم می‌کند.
• اتوکلاو: دستگاهی برای استریل کردن ابزار پزشکی و آزمایشگاهی در فشار و دمای بالا با استفاده از بخار آب می‌باشد.
• سانتریفیوژ: دستگاهی است که در آن با استفاده از نیروی گریزازمرکز مواد را از یکدیگر جدا می‌کند.
• میکسر ورتکس: دستگاهی برای مخلوط کردن نمونه‌های داخل لوله با حجم‌های کم کاربرد دارد و حرکت چرخشی و لرزشی روی محور خود دارد.
• دیونایزر: شامل یک ستون کاتیونی به همراه رزین کاتیونی و یک ستون آنیونی به همراه رزین آنیونی که قابلیت تولید آب خالص یا همان آب بدون یون با هدایت الکتریکی زیر 1  میکروزیمنس را داراست.
• و …

تنوع محصولات

محلول‌ها و بافرهای بسیاری در آزمایشگاه کشت سلول و بافت استفاده می‌شود که از جمله آنها می‌توان به :

• محلول Golgi Plug (BrefeldinA) مناسب برای متوقف‌کننده ترانسپورت داخلی
• محلول PBS مناسب برای رقت دادن به مواد، شستشوی ظرف و…
• محلول L-Glutamine مناسب برای تسریع رشد سلول‌ها
• رنگ viability stain
• رنگ DAPI
• معرف EA50
• معرف Eosin Y
• و …

اشاره نمود.

ارزش‌آفرینی

در فروشگاه اینترنتی وندیداز امکان انتخاب و خرید انواع محیط کشت‌های سلولی، رنگ‌ها و بافرهای مدنظر آنها فراهم گردیده است. همچنین علاوه بر امکان افزودن محصولات داخلی به سبد خرید و ثبت سفارش می‌توانید محصول وارداتی مدنظر خود را از شرکت استعلام نمایید.