بافر هپس – HEPES

بافر هپس که به نام HEPES نیز شناخته می‌شود، مناسب برای حفظ ساختار و عملکرد آنزیم در دماهای پایین می‌باشد. محلول HEPES( 2-4هیدروکسی اتیل -1- پیپرازین اتان سولفونیک اسید) با فرمول شیمیایی C8H18N2O4S، یک عامل بافری رایج مورداستفاده در آزمایشات کشت سلولی است به‌نحوی‌که اسیدیته بیولوژیک را در کشت سلولی فراهم می‌آورد. این بافر بیش‌تر در محیط کشت‌هایی اضافه می‌شود که تنظیم و نگه‌داشتن اسیدیته محیط بسیار مهم می‌باشد. این ماده آلی زوئیت رونی باعث حفظ pH فیزیولوژیک در برابر تغییرات غلظت دی‌اکسیدکربن می‌شود. همچنین   HEPES  ساختار عملکردی آنزیم‌ها را در دمای پایین بهتر حفظ می‌کند. برای جلوگیری سمیت ناشی از نور، بسیار توصیه می‌شود که HEPES و یا محلول‌های حاوی آن در تاریکی نگهداری شوند.

ویژگی‌ها و کاربرد بافر HEPES

بافر HEPES یک عامل بافری کننده شیمیایی زوئیترونیک آلی است که به حفظ pH فیزیولوژیکی بهینه در بازهٔ (6.8 تا 8.2) به رشد سلولی در حضور غلظت‌های دی‌اکسیدکربن کمک می‌کند. پس از اضافه‌کردن HEPES، سطح pH با افزودنNaOH  یا HCl تنظیم می‌شود. محلول HEPES در برخی از فرایندهای پایین‌دست پروتئینی پایین مانند آزمون سنجش پروتئین Folin-Ciocalteu توصیه نمی‌شود. آزمون سنجش پروتئین بیورت (Biuret) تحت‌تأثیر قرار نمی‌گیرد.

مشخصات بافر هپس

• ظاهر: مایع سفید شفاف
• فرمول مولکولی:  C8H18N2O4
• وزن مولکولی:  3/238

نکات تکمیلی بافر هپس

• به‌دوراز نور و در تاریکی نگه‌داری شود.
• HEPE  یکی از اجزای بکار رفته در محلول نمک  Hank’s balanced ، محیط DMEM و محیط DMEM بدون گلوکز است.