توضیحات

کاربرد کیت سنجش نیتریک اکساید :

نیتریک اکساید از اکسیداسیون درون‌سلولی ال – آرژنین توسط نیتریک اکساید سنتتازها تولید می‌شود. نیتریک اکساید در بسیاری از فرایندهای فیزیولوژیک از جمله تنظیم گشادی – تنگی عروق، ارتباط سلول‌های عصبی و پاسخ‌های ایمنی شرکت دارد. نیتریک اکسید به‌شدت ناپایدار است و در اثر اکسیداسیون به نیترات و نیتریت تبدیل می‌شود. این کیت برای سنجش نیتریک اکسید از طریق اندازه‌گیری میزان نیتریت به روش رنگ‌سنجی گریس کاربرد دارد.

اساس سنجش نیتریت به روش گریس :

در این روش مقدار نیتریت موجود در سوپزناتانت کشت سلول یا سرم با واکنش گریس تعیین می‌گردد. طی مرحله اول واکنش گریس، نیتریت با اسید سولفانیلیک واکنش داده و یون دی آزونیوم تولید می‌کند. در مرحله دوم واکنش، این یون با ترکیب ان-(1-نفتیل) اتیلن دی آمین جفت شده و ترکیبی از مشتقات آزو به رنگ صورتی تولید می‌کند.

محتوی کیت سنجش نیتریک اکساید :

محتویات هر بسته کیت (200-3201)برای انجام 200 تست کافی است

سایر مواد و وسایل موردنیاز:

1 – سمپلر و سرسمپلر برای حجم‌های 10 تا 1000 میکرولیتر
2 – 8 میکروتیوب برای تهیه رقت‌های مناسب از استاندارد
3 – دستگاه میکروپلیت ریدر مجهز به فیلتر 540 نانومتر و پلیت متناسب با دستگاه

تهیه رقت‌های استاندارد

۱- 8 میکروتیوب 5/1 میلی‌لیتری بردارید و A تا H نام‌گذاری کنید. مقدار 300 میکرولیتر buffer Dilution در تیوب‌های B تا H بریزید.
۲- 300 میکرولیتر از محلول استاندارد در تیوب A بریزید.

۳- 300 میکرولیتر از محلول استاندارد در تیوب B بریزید. خوب با سمپلر پیپت کنید و 300 میکرولیتر از آن را به تیوب C انتقال دهید تا غلظت استاندارد 100 میکرو مول به دست آید.

۴- همانند مرحله 3 به تهیه رقت از لوله D تا G ادامه دهید. در لوله H چیزی نریزید تا از آن برای Blank استفاده کنید.

۵- مطابق شکل مقدار 100 میکرولیتر از هر لوله را به‌صورت 3 تایی در چاهک پلیت 96 خانه بریزید.

انجام آزمایش:

1 نمونه‌های سوپرناتانت سلولی یا سرم را پس از جمع‌آوری سانتریفیوژ کنید تا ذرات ریز و سلول‌ها از آن حذف شود. سپس تا زمان جمع‌شدن کامل نمونه‌ها، آنها را در دمای 20 – درجه سانتیگراد (در صورت امکان 70 – درجه سانتیگراد) نگهداری کنید.
2 هنگام انجام آزمایش نمونه را به دمای اتاق برسانید. نمونه‌های سرم را با buffer Dilution به نسبت 2:1 رقیق کنید. از نمونه‌های سوپرناتانت سلولی یا سرم رقیق شده مقدار 100 میکرولیتر به‌صورت 3 تایی در هر چاهک پلیت 96 خانه بریزید.
3 برای تهیه معرف سنجش کیت نیتریک اکساید در 96 چاهک)یکپلیت(، مقدار 5 میلی‌لیتر از A Reagent را با مقدار 5 میلی‌لیتر از ReagentB در bottle Mixing مخلوط کنید و به‌آرامی هم بزنید تا محلول یکنواخت شود ولی کف نکند.

دقت کنید هنگام برداشتن محلول، A Reagent و B Reagent در ظروف اصلی با هم مخلوط نشود.
دقت کنید که اگر می‌خواهید در چند نوبت سنجش نیتریک اکساید را انجام دهید؛ یکباره همه A Reagent و B Reagent را با هم مخلوط نکنید. چون پس از مخلوط شدن، به‌شرط نگهداری در تاریکی تنها یک ماه قابل‌استفاده خواهند بود.

4 به هر چاهک دارای نمونه استاندارد، Blank و تست، 100 میکرولیتر از معرف را اضافه کنید. با دست یا با استفاده از شیکر کمی تکان دهید تا یکنواخت شود.
5 با استفاده از میکروپلیت ریدر، جذب نمونه‌ها را در 570 نانومتر بخوانید.

نگهداری کیت سنجش نیتریک اکساید :

کیت را در دمای 4 درجه سانتیگراد و در محل تاریک نگهداری کنید.

مطالب مرتبط

توضیحات تکمیلی

بسته بندی

200 تست, 100 تست

دیدگاهها

هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.

اولین نفری باشید که دیدگاهی را ارسال می کنید برای “کیت سنجش نیتریک اکساید سیب زیست”

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد.

شما شاید این را هم دوست داشته باشید