محلول نمک متعادل هنکس – HBSS

محلول HBSS که به نام محلول نمک متعادل هنکس نیز شناخته می شود، مناسب تهیه سوسپانسیون لنفوسیتی در آزمایش های HLA، کشت سلولی و آزمایش سازگاری گلبول های سفید می باشد. لنفوسیت ها در محلول هنکس به مدت ۲ روز در دمای 2 – 4 درجه زنده می مانند. نمک های مختلف موجود در محلول هنکس مخصوصا” نمک بی کربنات سدیم، سیستم بافری مناسبی را برای حفظ محیط در محدوده pH فیزیولوژیک فراهم می کند.

محلول HBSS یا محلول نمک متعادل Hank’s (Hanks’ Balanced Salt Solution) در سال 1949 بوسیله Hanks و Wallace برای حفظ سلول ها در محیط های دارای دی اکسید کربن کم یا فاقد دی اکسید کربن ساخته شد. محیط HBSS بعنوان یک محلول نمکی متعادل و تعریف می شود و به لحاظ شیمیایی، محیطی ایجاد می کند که تمامیت فیزیولوژیکی و ساختاری سلول ها را در محیط حفظ می کند.  این محصول فقط برای استفاده تحقیقاتی می باشد

بطور خلاصه، نقش یک محلول نمکی متعادل عبارت است از:

• حفظ تعادل اسمزی در داخل و خارج سلول
• فراهم کردن آب و یون های غیر آلی مورد نیاز برای متابولیسم سلول
• فراهم کردن انرژی لازم برای متابولیسم سلول
• اثر بافری برای حفظ pH فیزیولوژیک (7.2 – 7.6) در محیط

کاربرد محلول HBSS

HBSS برای طیف وسیعی از کاربردهای کشت سلول، مانند شستشوی سلول ها قبل از جداسازی از سطوح، حمل و نقل نمونه های سلولی یا بافتی، رقیق کردن سلول ها برای شمارش، و آماده سازی معرف ها استفاده می شود. فرمولاسیون های فاقد منیزیوم و کلسیم

محتویات محلول HBSS

• این محلول حاوی بیکربنات سدیم و فنل رد است.
• این محصول فاقد کلرید کلسیم و سولفات منیزیم است.
• به این محصول می توان بافر HEPES افزود برای حفظ بهتر pH فیزیولوژیک در غلظت های مختلف می باشد. محلول (HEPES  هیدروکسیل-پیپرازین اتان سولفونیک اسید) بعنوان یک عامل بافری شیمیایی به محیط اضافه می شود.

نکات تکمیلی

• به شرایط نگهداری محصول توجه کنید.
• بعد از اتمام تاریخ مصرف، از محصول استفاده نکنید.
• محصول را در فضای تاریک و دور از تابش نور نگهداری کنید.
• محصول را در شرایط استریل استفاده کنید. (بطور مثال زیر هود لامینار)
•  برای اجتناب از آلودگی، در هنگام استفاده از محصول از پوشش مناسب (مانند دستکش، ماسک، و کلاه بهداشتی) استفاده کنید.
• مکمل هایی مانند آنتی بیوتیک باید بصورت استریل به محیط کشت افزوده شوند. شرایط نگهداری و تاریخ مصرف محصول، با توجه به ماهیت مکمل تغییر خواهد کرد.
• محیط کشت باید شفاف و عاری از هرگونه ذرات معلق باشد. در صورتی که محیط کدر بوده یا حاوی رسوب باشد از آن استفاده نکنید.
• در مواردی که از این محیط کشت برای چندین نوبت استفاده می شود، توجه داشته باشید بعد از باز شدن محصول برای اولین بار، نسبت هوا به محیط افزایش خواهد یافت. بنابراین، محیط زودتر از حد انتظار قلیایی خواهد شد. توصیه می شود باقیمانده محیط در لوله های استریل 50 میلی لیتری نگهداری و درب آن را محکم ببندید. در این صورت تا تاریخ مصرف درج شده روی محصول قابل استفاده خواهد بود.