محیط کشت DMEM – F12

محیط کشت DMEM – F12 که به نام محیط کشت DMEM – Hams F12 یا Dulbecco’s Modified Eagle Medium: Nutrient Mixture F-12 نیز شناخته می‌شود، مناسب برای استفاده در سیستم‌های بـدون سرم، بخصوص در رشد سلول‌های CHO طراحی شده است. این امر به کمک مخلوط 1:1 از دو محیط کشت HAM’S F12 و DMEM میسر شده که باعث کیفیت بالاتر، سازگاری و کنترل بهتر کشت سلولی پستانداران شده است. اما لازم به ذکر است که محیط کشت DMEM/Hams F12 بایسـتی قبـل از مصرف با عوامل افزودنی تکمیلـی نظیـر انسـولین، ترانسفرین و فاکتور رشد اپیدرم غنی شوند. سیستم بافری این محـیط هپس – HEPES می‌باشد.

کاربرد و محتوای محیط کشت DMEM/F-12

محیط کشت DMEM/F-12 یک محیط کشت پایه بسیار رایج برای رشد انواع مختلف سلول مانند MDCK، سلول گلیال، فیبروبلاست، اندوتلیال انسان و همچنین فیبروبلاست‌های موش می‌باشد. این محصول ارائه شده در فروشگاه وندیداز از مخلوط محیط DMEM و محیط مغذی F-21 همراه با گلوتامکس/ال – گلوتامین، بی‌کربنات سدیم و فنل رد اختیار مشتریان گرامی قرار گرفته است. همچنین برای حفظ بهتر pH فیزیولوژیک در غلظت‌های مختلف دی‌اکسیدکربن، محلول HEPES (هیدروکسیل-پیپرازین اتان سولفونیک اسید)، به‌عنوان یک عامل بافری شیمیایی زوئیترونیک به محیط اضافه شده است.

نکات استفاده از محیط کشت DMEM – F12

• به شرایط نگهداری محصول توجه کنید.
• بعد از اتمام تاریخ مصرف، از محصول استفاده نکنید.
• محصول را در فضای تاریک و دور از تابش نور نگهداری کنید.
• محصول را در شرایط استریل استفاده کنید (به طور مثال زیر هود لامینار).
• برای اجتناب از آلودگی، در هنگام استفاده از محصول از پوشش مناسب (مانند دستکش، ماسک، و کلاه بهداشتی) استفاده کنید.
• مکمل‌هایی مانند آنتی‌بیوتیک باید به‌صورت استریل به محیط کشت افزوده شوند. شرایط نگهداری و تاریخ مصرف محصول باتوجه‌به ماهیت مکمل تغییر خواهد کرد.
• محیط کشت باید شفاف و عاری از هرگونه ذرات معلق باشد. درصورتی‌که محیط کدر بوده یا حاوی رسوب باشد از آن استفاده نکنید.
• در مواردی که از این محیط کشت برای چندین نوبت استفاده می‌شود، توجه داشته باشید بعد از باز شدن محصول برای اولین‌بار، نسبت هوا به محیط افزایش خواهد یافت؛ بنابراین، محیط زودتر از حد انتظار قلیایی خواهد شد. توصیه می‌شود باقیمانده محیط در لوله‌های استریل 50 میلی‌لیتری نگهداری شود. در این صورت تا تاریخ مصرف درج شده روی محصول قابل‌استفاده خواهد بود.
• برای آگاهی از مکمل‌ها و نیازهای رشد فیزیولوژیک اختصاصی برای رده‌های سلولی مختلف، بررسی و مرور مقالات توصیه می‌شود.