کیت الایزا G6PD

کیت الایزا G6PD جهت غربالگری بیماری فاویسم در نوزادان مورداستفاده قرار می‌گیرد. در بیماران مبتلا به کمبود G6PD به دلیل کاهش NADPH گلبول‌های قرمز (RBC) در برابر مواد اکسیدکننده حساس شده و در صورت مصرف داروها و مواد غذایی اکسیدکننده هموگلوبین اکسید شده و در جدار RBC رسوب‌کرده و در نتیجه باعث لیز RBC می‌شود. اگر والدین ندانند که کودکشان مبتلا به فاویسم است کودک با در معرض قرارگرفتن برخی مواد اکسیدکننده از جمله داروهای آسپرین و فناستین و برخی مواد غذایی از جمله باقلا دچار لیز گلوبولین شده و به بستری و تزریق خون نیاز پیدا خواهد کرد.

آنزیم گلوکز 6 فسفات دهیدروژناز (G6PD) چیست و چرا اندازه‌گیری می‌شود؟

آنزیم GLucose-6-phosphate dehydrogenase) G6PD) آنزیمی سیتوپلاسمیک است که اولین واکنش چرخه متابولیکی پنتوز فسفات را کاتالیز می‌نماید. در این واکنش هم زمان با اکسیداسیون گلوکز – فسفات به فسفوگلوکونولاکتون (+NADP) احیاء و به NADPH تبدیل می‌گردد. کمبود این آنزیم شایع‌ترین نقص آنزیمی ژنتیکی (وابسته به کروموزوم X) می‌باشد.

بیش از 400 میلیون نفر در سراسر جهان به این کمبود با تظاهرات بالینی همولیز (وابسته به دارو، عفونت، فاویسم و…) مبتلا هستند. در غیاب فعالیت این آنزیم، همولیز حاصله باعث تولید هِم می‌گردد. هِم تولید شده توسط آنزیم هموکسیژناز به بیلی وردین و سپس به بیلی‌روبین تبدیل می‌شود.

باتوجه‌به امکان بروز صدمات شدید نورولوژیکی حاصل از تجمع بیلی‌روبین غیر کونژوگه در مغز نوزاد مبتلا به یرقان، نظیر کرون ایکتروز، بررسی کمبود این آنزیم در نوزادان حائز اهمیت می‌باشد. با استفاده از کیت الایزا G6PD می‌توان با اندازه‌گیری این آنزیم از بروز تظاهرات بالینی حاصل از همولیز گلبول‌های قرمز جلوگیری به عمل آورد.

تأمین‌کنندگان کیت الایزا G6PD فروشگاه وندیداز

• پادتن علم

کیت اندازه‌گیری G6PD پادتن علم پر مبنای سنجش واکنش آنزیماتیک طراحی شده است. بدین منظور ابتدا دایره‌هایی به قطر 5 میلیمتر از خون خشک شده بر روی فیلتر کاغذی را در داخل حفره‌های پلیت قرار داده سپس آب مقطر بر روی لکه‌های خونی اضافه می‌شود.

بعد از طی زمان انکوباسیون، محلول همولیز حاصله به حفره‌های پلی‌استیرن جدید منتقل می‌شود. آنزیم استخراج شده از خون لیز شده در حضور کوآنزیم +NADP، گلوکز 1 فسفات را اکسید کرده و به ۹ فسفر کلوکونولاکتون تبدیل می‌کند. واکنش NADPH بانمک “Tetrazolium” باعث ایجاد رنگ آلبالویی می‌شود.

شدت رنگ ایجاد شده با غلظت G6PD موجود در نمونه‌ها نسبت مستقیم دارد. شدت رنگ‌دهی با اسپکتروفتومتر مخصوص میکروپلیت در طول موج 492 نانومتر با دیفرانسیل 630 نانومتر اندازه‌گیری می‌شود. برای تعیین نیمه کمی فعالیت آنزیماتیک G6PD نمونه‌ها ابتدا منحنی جذب نوری استانداردها برحسب فعالیت آنزیماتیک G6PD آنها رسم و سپس فعالیت آنزیماتیک G6PD نمونه از روی منحنی استاندارد تعیین می‌شود.

شما می‌توانید پروتکل محصول، محتویات کیت، وسایل موردنیاز و همچنین نحوه محاسبه نتایج را از کاتالوگ قرار داده شده مطالعه نمایید.