علمی و آموزشی
در صورت رعایت اصول آسپیتک لازم نیست که همیشه از آنتی بیوتیک های محیط کشت سلولی استفاده شود. رایج ترین آنتی بیوتیک های محیط کشت سلولی مورد استفاده پنی سیلین و استرپتومایسین می باشـند. ایـن آنتی بیوتیک ها معمولاً بصورت مخلوطی از پنی سیلین بمقدار ۱۰۰واحد در میلی لیتر (بـرای جلوگیری از رشد باکتری های […]
در مبحث قسمت اول در رابطه با نمونه گیری برای آزمایشات کشت سلولی از بافت های بالغین و جنینی صحبت کردیم و مزایا و معایب هر روش مطرح شد. هم اکنون در رابطه با نمونه گیری برای آزمایشات کشت سلولی از سلول های بنیادی رویانی و تفاوت کشت سلول از بافت طبیعی و سرطانی مطرح […]
مورفولوژی سلول ها در آزمایش کشت سلول به یکی از دو شکل معلق یـا چسـبان دیـده می باشد. سلول های معلق به صورت سلول های تک تک یا مجموعه های سلولی آزاد شناور در محیط کشت فلاسک ها دیده می شوند. سلول های چسبان به صورت تک لایه به فلاسک کشت سلولی چسبیده و رشد […]
هنگام انجام پاساژ سلولی غلظت سلول های منتقل شده به فلاسک بـه نـوع تیـره سـلولی و شـرایط دیگر آزمایش بستگی دارد. مثلاً در رابطه با سلول های شناور، حجم محیط کشت و در رابطه با سلول های چسبیده، سطح بستر اتصال بیشترین اهمیت را دارد. اما بطور کلی جهت ایجاد و حفظ شرایط بهینه رشد […]
پیش از این مطلب با پروتکل پاساژ رده های سلولی آشنا شدید. در این مطلب سعی داریم نکات علمی و کاربردی که به احتمال زیاد در هنگام پاساژ رده های سلولی در فضای آزمایشگاه کشت سلولی با آن رو به رو می شوید را به شما آموزش دهیم: نکات کلیدی ۱- بعضی از سلول ها […]
روش تهیه معرف های آزمایشگاهی نین هیدرین پودر نین هیدرین= ۳/۵g استن= ۵۰cc بوتانول = ۵۰cc استن و بوتانل را مخلوط کرده و سپس پودر نین هیدرین را اضافه نمایید. معرف های آزمایشگاهی در ظـرف تیـره و در دمای اتاق نگهداری می شود. درب آن باید کاملاً محکم بسته شود روش تهیه ویتامین K1 پودر […]
روش تهیه معرف آزمایشگاهی VP – تهیه آلفا نفتول (معرف A) پودرآلفا نفتول: ۵g اتانول: ۱۰۰cc -تهیه KOH ( پتاس ) (معرف B): ۴۰g :KOH کراتین (cr) : 0.3g آب مقطر: ۱۰۰cc معرف ها در ظروف تیره و در یخچال نگهداری میشوند. چون دارای پایداری متغیر هستند لازم اسـت به طور هفتگی (بر حسب میزان […]
در رنگ آمیزی رایت – گیمسا گسترشی که با رنگ رایت-گیمسا به خوبی رنگ امیزی شده باشد در هنگام بررسی با چشم غیر مسلح به رنگ صورتی خواهد بود. در بزرگنمایی کم میکروسکوپ ، سلولها باید یکنواخت توزیع شده باشند.گلبولهای قرمز به رنگ صورتی هستند ، نه به رنگ لیمویی یا قرمز . رسوب رنگ […]
در رنگ آمیزی گرم باکتری ها ، تقریبا تمام میکروارگانیسم ها به دو گروه متمایز ، گرم مثبت و گرم منفی ، تقسیم می شوند. این نوع تقسیم بندی بر اساس تفاوت در دیواره سلولی باکتری هاست. در این روش ، رنگ اصلی یعنی رنگ پایه کریستال ویوله با گروه های بار منفی موجود در […]
رنگ کریستال ویوله برای رنگ آمیزی سلول های باکتری به کار می رود. این روش ، اطلاعاتی را در مورد مورفولوژی ارگانیسم های رنگ آمیزی شده آشکار می سازد. مشاهده بسیاری از ارگانیسم ها به وسیله میکروسکوپ نوری مشکل است ، زیرا ، آن ها نور را به مقدار زیاد جذب ، منعکس یا منکسر […]
هدف از انجام پروتکل رنگ آمیزی رایت گیمسا : شمارش افتراقی و بررسی مرفولوژی گلبولهای سفید ، قرمز و پلاکت. موارد کاربرد : ارزیابی و تشخیص انواع کم خونی و روند درمان آنها. بررسی انواع ناهنجاریهای پلاکتی گلبولهای سفید و لوسمی ها و روند درمان آنها. تجهیزات و مواد مورد نیاز قبل از انجام پروتکل […]
سلول های کشت داده شده در آزمایشات کشت سلولی می توانند از بافت های بالغین یا جنین مشتق شده باشـند. کشـت های مشتق از بافت های جنینی عموماً عمر بیشتری داشته و بهتر رشد می کننـد. تقریبـاً هـر قسمت از بافت های جنین را می توان به راحتی کشـت داد. امـا کشـت بافـت هـای بـالغین […]
ضد عفونی و گندزدایی پس مانده ها و فضولات آزمایشگاه کشت سلول ، سـطوح کـار و تجهیـزات در کـاهش خطرات اهمیت بسزایی دارد. بطور کلی عوامل ضد عفونی کننده به چهـار گـروه تقسـیم مـیشوند که در زیر بطور خلاصه به هر کدام اشاره می شود: ۱٫ هیپوکلریت ها مثل آب کلره و آب ژاول: هیپوکلریت […]
رنگ آمیزی کپسول باکتری ها ، مشاهده کپسول باکتری ها را مقدور می سازد. دیواره سلولی برخی از باکتری ها به وسیله لایه ای مرکب از پلی ساکارید ها ، گلیکو پروتئین ها یا اشتراکی از پلی ساکارید ها و پلی پپتید ها تشکیل شده اند. این لایه را همچنین گلیکوکالیکس هم می نامند. وجود […]
رنگ آمیزی اسپور باکتری ها، مشاهده اجزایی به نام اندوسپور را مقدور می سازد. اسپور، ساختمان خاصی است که توسط برخی از باکتری ها تولید می شود. اسپور با استفاده از مالاشیت سبز و سیتوپلاسم سلول با به کار بردن سافرانین رنگ آمیزی می شود. مالاشیت سبز به سهولت به درون اسپور نفوذ نمی کند […]
امروزه تقریباً تمام مواد مصرفی کشت سلول نظیر فلاسک ها، لوله ها، پیپت ها و ویـال هـای انجمـاد سلولی به صورت لوازم استریل یک بار مصرف پلاستیکی عرضه می شوند. فلاسک هـا اغلـب از جنس پلی استیرن هستند. مهمترین تولید کننده های مواد مصرفی کشت سلول یک بار مصرف شرکت های سیگما، نانک، گرینر، کورنینگ […]
باکتریها به شکل کلنی بر روی محیط های جامد رشد می کنند. کلنی به عنوان یک توده قابل مشاهده از میکروارگانیسم ها تعریف شده است که همگی از یک سلول مادر واحد منشأ می شوند، بنابراین یک کلونی از باکتری های یکسان از نظر ژنتیکی تشکیل می شود. در شناسایی باکتریها و قارچها چگونگی رشد […]
استاندارد مک فارلند McFarland مرجعی برای تخمین کدورت و میزان باکتری معلق در مایعات می باشد. برای تخمین غلظت باکتری، محلول آن با لوله استاندارد مقایسه می شود. در ادامه روش تهیه استاندارد مک فارلند شرح داده شده است؛ لوله های استاندارد با مخلوط کردن کلرید باریوم (BaCl2) 1% و اسید سولفوریک (H2SO4) 1% بر […]
ظروف شیشه ای استاندارد آزمایشگاهی مثل بشر و فلاسک ، در سنجش حجم دقت محدودی دارند که معمولا این دقت ±5% می باشد. الف)دقت ظروف با این حال این ظروف بسیار دقیق در نظر گرفته می شوند. این دقت توسط قطعه ی کوچکی بر روی ظرف شیشه ای که بر روی آن مقداری از اطلاعات […]
روشی برای استخراج DNA پلاسمید از سلولهای باکتریایی تشریح شده است. این روشی سریع برای استخراج پلاسمید که می تواند با استفاده از ژل الکتروفورز ۱۰۰ یا بیشتر کلون در روز آنالیز کند و DNA پلاسمید به اندازه کافی خالص است که با آنزیم های محدود کننده قابل هضم است.
